عنوان پایان‌نامه
بررسی و بهینه سازی افزایش تولید تری ترپن ها در قارچ Ganoderma lucidum و ارزیابی رهایش آن ها از سامانه نانو ساختار
- رشته تحصیلی
- علوم فنون - بیوتکنولوژی
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 74165;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 74165
- تاریخ دفاع
- ۰۳ بهمن ۱۳۹۴
- دانشجو
- فهیمه نوجوکی
- استاد راهنما
- اشرف السادات حاتمیان زارمی, محمد میردریکوند
- چکیده
- قارچ دارویی Ganoderma lucidum که در چین لین¬ژی خوانده می¬شود قارچ سنتی رایج در شرق آسیا است که برای قرن¬ها در ارتقاء سطح سلامت و افزایش امید به زندگی نقش داشته است. این قارچ دارای انواع متابولیت¬های دارویی است. در این بین دو دسته از تری¬ترپن¬ها شامل گنودریک¬اسید¬ها و گنودریل¬ها و دسته پلی-ساکارید¬ها مانند مانان به دلیل داشتن خواص ارزشمند دارویی چون مهار رشد تومور و درمان سرطان مورد توجه ویژه¬ای قرار گرفته¬اند. در این پژوهش به بررسی افزایش تولید تری¬ترپن¬ها از این قارچ با استفاده از چند الیسیتور جدید از دسته القاکننده¬های شیمیایی سیتوکوروم P450 (به عنوان عامل تحریک تولید تری¬ترپن¬ها)، عصاره تنباکو (به عنوان یک القاکننده زیستی و عامل القای آپوپتوز و القای سیتوکوروم P450¬) و دسته¬ای از تنش¬دهنده¬های مکانیکی مانند ماورای بنفش و امواج فرا صوت پرداخته شده است. در بخش اول تاثیر شش داروی تجاری ریفامسین، تتراسیکلین، فنوتوئین، دگزامتازون، کاربامازپین، تئوفیلین و امپراوزل بر وزن خشک سلولی و گنودریک اسید بررسی شد و نتایج با داده¬های بدست آمده از تاثیر فنوباربیتال بر قارچ Ganoderma lucidum مقایسه گردید. در ادامه اثر عصاره تنباکو به عنوان یک ماده ارزان قیمت، القاکننده آپاپتوز و القاکننده سیتوکوروم P450 قوی بر وزن خشک سلولی و تولید متابولیت¬ها بررسی شد. در نهایت اثر تنش¬زای عوامل شوک¬های مکانیکی بر رشد و تولید گنودریک اسیدها مورد ارزیابی قرار گرفت. نتایج نشان داد فنوتوئین الیسیتور شیمیایی مناسبی است و اثر آن در شرایط کنترل شده بر رشد سلولی، وزن خشک و گنودریک اسیدهای تولیدی در فلاسک¬های دو لیتری و سپس در بیوراکتور 5 لیتری مورد ارزیابی قرار گرفت. برای بهینه¬سازی عوامل از روش پاسخ سطح استفاده شد و نتایج نشان داد که میزان 25 میلی¬گرم در لیتر فنوتوئین القاشده در روز هفتم به کشت مایع Ganoderma lucidum، تا 425 میکروگرم بر گرمِ وزن خشک، گنودریک اسید تولید می نماید. در ادامه این پژوهش، متابولیت¬های بدست آمده با استفاده از فناوری الکتروریسی روی ساختارهای نانو الیاف ژلاتین برده و امکان¬سنجی استفاده از این سامانه¬های نانویی در رهایش متابولیت¬های ارزشمند قارچ Ganoderma lucidum بررسی شد. به این منظور در ابتدا با استفاده از شرایط بهینه تولید نانوالیاف از قبیل ویژگی¬های محلول ژلاتین، ویژگ
- Abstract
- Medicinal mushroom Ganoderma lucidum in China called "Lin Zhi". This mushroom has a variety of pharmaceutical metabolites. In the meantime, two of the more terpenes include ganoderic acids, ganoderols and category of polysaccharides such as mannan have valuable properties such as inhibition of tumor growth and cancer treatment. for this reason they have been under special attention. In this study, the increased production of terpenes of this fungus using the new chemical elicitors (CYP inducer), tobacco extract (as a biological inducer for apoptosis and CYPs) and a bunch of mechanical stresses, such as ultraviolet and ultrasound are discussed. The first, effect of the six commercial medicine, rifampin, tetracycline, phenytoin, dexamethasone, carbamazepine, theophylline and omeprazol on dry cell weight and ganodric acid was investigated and the results with data obtained from effect of phenobarbital on the Ganoderma lucidum was compared. The effects of tobacco extract as a cheap material, apoptos inducer and a strong P450 inducre on cell dry weight and metabolite production were studied. As well as, the effect of mechanical stress on the development and production of ganoderic acids were evaluated. In the end, metabolites loaded on gelatin nanofibers by using electrospinning technology and feasibility of this system in the delivery of ganoderic acids was investigated. For this purpose, the production of nanofibers by using optimum conditions, such as characteristics of gelatin solution, the electrical power system characteristics and distance to the collector was conducted. SEM images were checked and size of nanofibers was found. FTIR study and drug release in PBS show use of sedimentary method to maximize the amount of ganoderic acid dissolution is effective. While using electrospun nanofibers and removal of solvent is a new technique to minimize the size of the nanocrystals and ganoderic acid controlled release.
