عنوان پایان‌نامه
مطالعه ی اثر نانوژل ها بر ساختار و عملکرد پروتئین مدل
- رشته تحصیلی
- نانوبیوتکنولوژی
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 73758
- تاریخ دفاع
- ۱۳ بهمن ۱۳۹۴
- دانشجو
- صفورا سالار
- استاد راهنما
- فرامرز مهر نژاد
- چکیده
- امروزه برهم کنش بین سیستم های دارورسانی و عوامل زیستی به شدت مورد توجه واقع شده است. نانوذرات کیتوزان از جمله نانوذرات پلیمری پرکاربردی هستند که برای رسانش پروتئین ها بکار می روند. اما تاکنون از آنها برای رسانش آنزیم استفاده نشده است و بدین منظور باید برهم کنش بین آنها بررسی شود. هدف از این پژوهش تاثیر نانوذرات کیتوزان بر روی ساختار و فعالیت آنزیم مورد نظر است. نانوذرات مزبور، به روش ژل سازی یونی تهیه و ویژگی آنها مورد ارزیابی قرار گرفت. اندازه ی نانوذرات، پتانسیل زتا تعیین شد. از اسپکتروسکوپی فلورسانس با هدف بررسی تغییر فلورسانس تریپتوفان آنزیم مدل )PDI( و شاخص پراکندگی استفاده گردید. بعلاوه، فعالیت آنزیم در حضور نانوذرات و در شرایط مختلف سنجیده شد. از میکروسکوپ الکترونی نگاره نیز برای بررسی مورفولوژی نانوذرات استفاده شد. آنالیز نانوذرات مزبور نشان داد که با تغییر غلظتهای کیتوزان (SEM) می توان اندازه ی آنها را کنترل کرد. همچنین مشاهده شد که pH و تری پلی فسفات، تغییر نسبت حجمی آنها و تنظیم فعالیت آنزیم در حالت کمپلکس با نانوذرات نسبت به حالت آزاد، با گذشت زمان اندکی تغییر می یابد که بیانگر برهم کنش در حالت کمپلکس با نانوذرات کاهش یافت که به )Km( بین نانوذرات و آنزیم است. به علاوه، تمایل آنزیم به سوبسترا علت انتشار محدود سوبسترا درون ماتریس نانویی است. سرعت آنزیم نیز به علت تغییرات کانفورماسیون افزایش یافت.
- Abstract
- Nowadays, the interaction between biological factors and drug delivery systems is strongly considered. Chitosan nanoparticles including polymeric nanoparticles are widely used to deliver proteins. So far nanoparticles has not been used to deliver enzymes and therefore interactions between them should be studied. In this study the effect of chitosan nanoparticles on the structure and activity of the enzyme was desired. We used ionic gelation method for preparation of nanoparticles and assessed their characteristics. Particle size, zeta potential and poly disparity index (PDI) was determined. Field emission scanning electron Microscope monitored the morphology of nanoparticles. Fluorescence spectroscopy was used to study the enzyme tryptophan fluorescence changes. In addition, the enzyme activity was measured in the presence of nanoparticles in various conditions. Analysis indicated that changes of the chitosan and three polyphosphate concentrations, changes of their volume ratio, and adjusting pH would control the size of nanoparticles. It was also observed that the activity of the enzyme in complex with nanoparticles slightly increased than in the Free State, which represents the interactions between nanoparticles and enzymes. In addition, the tendency of the enzyme to the substrate (Km) in complex with nanoparticles reduced because of limited diffusion of the substrate into the matrix. The velocity increased because of conformational changes.
