عنوان پایان‌نامه
” مقایسه‌ی پپتیدهای ضد میکروبی القایی با باکتری هایBacillus thuringiensis و Pseudomonas fluorescens در لاروهای کرم ابریشم
- رشته تحصیلی
- مهندسی کشاورزی-حشره شناسی کشاورزی
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه مرکزی پردیس کشاورزی و منابع طبیعی شماره ثبت: 6888;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 74754;کتابخانه مرکزی پردیس کشاورزی و منابع طبیعی شماره ثبت: 6888;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 74754
- تاریخ دفاع
- ۲۰ بهمن ۱۳۹۴
- دانشجو
- راضیه پورشیخی
- استاد راهنما
- رضا طلایی حسنلویی
- چکیده
- سیستم ایمنی حشرات در برابر بیمارگرهای مهاجم با پاسخهایی مانند فاگوسیتوز، تشکیل گره، فعال شدن آنزیم فنل اکسیداز و القای پپتیدهای ضدمیکروبی متنوع علیه بیمارگرها، واکنش نشان میدهد. پپتیدهای ضدمیکروبی یکی از راهکارهای دفاعی مهم سیستم ایمنی حشرات میباشند، که با ورود میکروارگانیسمها به بدن فعال میشوند. در پژوهش حاضر، به مقایسه‌ی پپتیدهای ضد میکروبی القا شده در سیستم ایمنی هیومرال کرم ابریشم Bombyx mori، تیمار شده با باکتریهای Bacillus thuringiensis و Pseudomonas fluorescen، با پپتیدهای موجود در همولنف در حالت تیمار نشده پرداخته شد. بررسی و مقایسه‌ی پپتیدها توسط ژل SDS-PAGE حاکی از وجود باندهای پپتیدی متفاوت بین لاروهای تیمار شده و شاهد بود. زمانی که لاروهای کرم ابریشم در چالش با باکتری Pseudomonas fluorescens (به عنوان یک باکتری گرم منفی) قرار گرفتند، شدت بیان باندهای پروتئینی شش ساعت پس از تزریق بود که تفاوت باندهای تیمار شده با شاهد نیز در همین ساعت مشاهده گردید. در صورتیکه هنگامی که لاروهای کرم ابریشم با باکتری Bacillus thuringiensis (به عنوان یک باکتری گرم مثبت) تیمار گردیدند، شدت بیان باندهای پروتئینی با گذشت زمان خونگیری از لاروها تا 24 ساعت به تدریج افزایش یافت و باندهای متفاوتی در 12 و 24 ساعت پس از چالش قابل رویت شدند یعنی به گونهای میتوان گفت، حشره افزایش بیان (پپتید) وابسته به زمان نسبت به آلودگی از خود نشان داده است. به آن دلیل که یکی از کاربردهای مهم پپتیدهای ضدمیکروبی حشرات، کنترل بیماریهای گیاهی و جانوری است، بنابراین، طی این تحقیق به اثرات آزمایشگاهی ضد باکتریایی پلیپپتیدهای استخراج شده پرداخته شد. برای آزمودن پتانسیل پلیپپتیدهای به دست آمده، دو نوع باکتری بیمارگر گیاهی گرم منفی، باکتری Ralstonia solanacearum (عامل پژمردگی باکتریایی سیبزمینی) و باکتری Xanthomonas axonopodis (عامل شانکر باکتریایی مرکبات) انتخاب شدند، که دارای قدرت کنترلکنندگی خوبی در برابر باکتری Ralstonia solanacearum بودند. واژههای کلیدی: سیستم ایمنی هیومرال، پپتیدهای ضد میکروبی، SDS-PAGE، Bombyx mori.
- Abstract
- Insect immune system against invading pathogens responses, will react, such as phagocytosis, nodulation, activation of phenoloxidase and induction of antimicrobial peptides various against the pathogen. Antimicrobial peptides are one of the ways the immune system defense in the insects, that activated by entering microorganisms the body. In this study, to the compare the antimicrobial peptides induced in the Humoral immune system in the silkworm, Bombyx mori, that treated with Bacillus thuringiensis bacteria and Pseudomonas fluorescen, with the peptides present in the hemolymph in mode of untreated. Check and comparison of peptides by SDS-PAGE gels indicating the presence of different peptide bonds between the treated and control larvae. When the Silkworm larvae challenged with the bacteria Pseudomonas fluorescens (as a Gram-negative bacterium), The intensity of expression of protein was six hours after injection that the difference of bands of treated with the control was observed in this time. But when the Silkworm larvae with bacteria Bacillus thuringiensis (as a Gram-positive bacteria) were treated, Over time the blood collection of larvae, The intensity of expression of protein bands was gradually increased to 24 hours, and the different bands were visible at 12 and 24 hours after challenge. That's mean, We can say, Insect increased expression (peptide) of the time of the pollution is shown. For this reason, one of the important applications of antimicrobial peptides, insect is plant and animal disease control. Therefore, in this study to lab effects of antimicrobial polypeptides were extracted. For testing the potential of derived polypeptides, Two types of gram-negative the bacteria plant pathogen, the bacteria Ralstonia solanacearum (Agent potato bacterial wilting) and the bacteria Xanthomonas axonopodis (Agent citrus bacterial canker) were selected, That has the well controllers power in front of the bacteria Ralstonia solanacearum. Key words: Humoral i
