عنوان پایاننامه
اثر سطوح مختلف دی متیل سولفوکسید و دی متیل استامید در رقیق کننده منی بر انجماد پذیری اسپرم خروس
- رشته تحصیلی
- مهندسی کشاورزی- علوم دامی - فیزیولوژی دام
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه مرکزی پردیس کشاورزی و منابع طبیعی شماره ثبت: 6870;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 74484;کتابخانه مرکزی پردیس کشاورزی و منابع طبیعی شماره ثبت: 6870;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 74484
- تاریخ دفاع
- ۲۵ شهریور ۱۳۹۴
- دانشجو
- مهرسا محسنی
- استاد راهنما
- احمد زارع شحنه
- چکیده
- فرایند انجماد و یخ¬گشایی اسپرم طیور ، شامل رقیق کردن اسپرم با یک محیط حاوی مواد محافظ انجماد، برخی از قندها و بافر (جهت تثبیت pH محیط)، کاهش دما به صفر درجه سانتی¬گراد، انجماد و ذخیره، یخ¬گشایی و سرانجام حذف ماده محافظ انجماد است. در فرایند یخزدن اسپرم برخی تنش¬های اسمزی، شیمیایی و مکانیکی رخ می¬دهد که این باعث بروز آسیب¬های ساختاری و بیوشیمیایی به سلول اسپرم شده و زندهمانی و باروری آن را تحت تاثیر قرار می ¬دهد. هدف این مطالعه، تعیین اثر برخی از حفاظت¬کنندههای سرمایی روی زنده¬مانی و جنبایی اسپرم به دست آمده از 10 خروس نژاد راس 308 با سن 40 هفتگی (همه¬ی خروسها از یک گله بوده و از شرایط محیطی مشابه¬ای چون تغذیه، دما و نور برخوردار بودند) می¬باشد. اسپرم¬گیری از پرندگان به روش مالش شکمی انجام شد. پس از جمعآوری اسپرمها به آزمایشگاه منتقل شده و پس از ارزیابی¬های اولیه مراحل سرد سازی و انجماد بر روی آن¬ها انجام گرفت. پس از یخ¬گشایی، جنبایی با استفاده از نرم¬افزار CASA، درصد اسپرمهای زنده با بهره¬گیری از رنگ¬آمیزی ائوزین – نگروزین و میزان پراکسیداسیون لیپیدها با اندازه¬گیری میزان مالون دی¬آلدهید تولیدی به روش تیوباربیتوریک اسید (TBA) ارزیابی شدند. نتایج از این پژوهش نشان داد که GLY و DMSO در تاثیر¬گذاری بر درصد اسپرمهای پیشرونده فاقد اختلاف معنی¬دار با یکدیگر بودند و سطح 04/0 درصد DMSO و GLY به ترتیب با 66/58 درصد و 66/45 درصد بیشترین و کمترین درصد اسپرم پیشرونده را بین دو محافظت کننده انجماد اسپرم GLY و DMSO نشان می¬دهند. محافظت کننده DMA به طور معنی-داری سبب کاهش درصد اسپرم پیشرونده شد. GLY و DMSO در میزان تاثیرگذاری روی صفات حرکتی اسپرم فاقد اختلاف معنی¬دار با یکدیگر بودند در حالیکه DMA سبب کاهش صفات حرکتی شد و با دو تیمار آزمایشی دیگر یعنی GLY و DMSO دارای اختلاف معنی¬دار بود. سطوح DMA سبب کاهش میزان درصد زندهمانی در آزمایش ائوزین-نگروزین شد. سطح 08/0 درصد DMA با 47 درصد زنده مانی کمترین میزان زندهمانی را در روش ائوزین-نگروزین نشان داد. بیشترین سطح زندهمانی در این روش مربوط به سطح 08/0 درصد DMSO بود. میزان سیالیت غشای اسپرم تحت تاثیر سطوح مختلف تیمارهای آزمایشی قرار گرفت. سطح 04/0 DMA با 33/55 درصد سیالیت و سطح 08/0 درصد DMA با 83/86 درصد به ترتیب کمترین و
- Abstract
- Cryopreservation included primary exposing sperms with protective material, reduce the temperature to below zero degrees Celsius, storing, thawing, and finally remove the Cryoprotectant and return to normal state in the freezing occured osmotic stress, chemical and mechanical injury that causes structural and biochemical affect the survival and fertility. The object of this test was to determine the effect of DMA, DMSO and glycerol to improve the viability and motility of Ross 308 rooster's sperm. Collected sperm from birds was abdominal massage technique. After collecting the diluted and Proccessed sperm divided into treatment groups of 4, 6 and 8% glycerol, 4, 6 and 8% dimethyl sulfoxide and dimethyl acetamide 4, 6 and 8% and refrigeration and freezing procedure were performed on them. After thawing, the viability, membrane integrity and total abnormality were assessed. The results showed that total levels of DMA decreased viability rate. Minimum and maximum viability related to the addition of 8% DMA and 8% DMSO, respectively. The addition of 4% DMA with 33/55 percent and 8% DMA with 83/86 percent showed minimum and maximum percentage of sperm membrane integrity, respectively. The addition of 4% DMSO with 03/93 percent and 8% DMSO with 76/99 percent, respectively showed minimum and maximum amount of total abnormality.also, the motility, was checked by CASA. The results showed that GLY and DMSO no significant difference in Percent of progressive sperm and 4% DMSO and GLY with 58/66 and 45/66 percent respectively (p> 0.05).Indicated the highest and lowest percentage of progressive sperm. DMA significantly reduced percent of progressive sperm (p> 0.05). The lipid peroxidation by measuring malondialdehyde production by thiobarbituric acid method (TBA) were evaluated. Keywords: rooster sperm- Cryoprotectant- Dimethylacetamide- Dimethyl Sulfoxide- glycerol