بررسی القاء هاپلوئیدی در خیار از طریق کشت تخمدان
- رشته تحصیلی
- مهندسی تولیدات گیاهی- اصلاح گیاهان باغبانی
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه پردیس ابوریحان شماره ثبت: 867;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 73429;کتابخانه پردیس ابوریحان شماره ثبت: 867;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 73429
- تاریخ دفاع
- ۳۱ شهریور ۱۳۹۴
- دانشجو
- حسین کریمی فر
- استاد راهنما
- محمود لطفی, شیوا عزیزی نیا
- چکیده
- گیاهان هاپلوئید اغلب از بافتهای جنین هاپلوئید بدون انجام لقاح به دست میآیند. در برنامههای به نژادی مرسوم، لاینهای خالص حاصل چندین نسل خودگشنی هستند و ممکن است 100% خالص نباشند. اما با روش هاپلوئیدی میتوان در زمان کوتاه به لاین خالص دست یافت. در مطالعه حاضر تاثیر عوامل مختلفی مانند ژنوتیپ، هورمون، مرحله نموی تخمدان و محیط کشت بر صورت فراوانی القای جنین، میانگین جنین در هر قطعه و درصد قطعه جنینزا، بعنوان نشان دهنده پاسخدهی به مادهزایی در خیار مورد مطالعه قرار گرفتند. در بخش اول آزمایش جهت تعیین بهترین محیط کشت القایی، دو محیط MS و CBM بعنوان فاکتور اول و چهار ژنوتیپ(اصفهان، تبریز، سوپر دامینوس و سوپرسلطان) بهعنوان فاکتور دوم در قالب آزمایش فاکتوریل بر پایه کرتهای کاملا تصادفی با هم مقایسه شدند. نتایج این آزمایش تفاوت معنیداری از نظر صفات مطالعه شده در بین محیط کشتها نشان نداد. در آزمایش دوم تاثیر دو زمان برداشت تخمدان 12 ساعت قبل از شکوفایی و حین شکوفایی گل بعنوان فاکتور اول به همراه چهار ژنوتیپ بعنوان فاکتور دوم در پایه کرتهای کامل تصادفی با هم مقایسه شدند. با توجه به نتایج آزمایش اول محیط کشت MS در دیگر آزمایش ها استفاده گردید. نتایج تجزیه واریانس آزمایش دوم نشان داد که اثر متقابل ژنوتیپ در زمان برداشت معنیدار نبود اما برداشت تخمدان 12 ساعت قبل از شکوفایی گل اثر مثبتی بر القا مادهزایی داشت. آزمایش سوم برای بررسی تاثیر سه غلظت مختلف تیدیازرون (0، 0/02 و 0/04 میلیگرم در لیتر) و دو مقدار نیترات نقره(0، 0/4 و 0/8میلیگرم در لیتر) بر روی چهار ژنوتیپ طراحی شد. آزمایش به صورت فاکتوریل و در قالب کرتهای کاملا تصادفی اجرا گردید. طبق نتایج بررسی، اثر سه جانبه ژنوتیپ در تیدیازرون و نیتراتنقره برای صفات مورد ارزیابی معنیدار بود. برای پی بردن به تاثیر غلظتهای نیترات نقره و تیدیازرون در هر ژنوتیپ، ژنوتیپها به صورت جداگانه تجزیه و تحلیل شدند. نتایج تجزیه واریانس برای ژنوتیپ اصفهان نشان داد که در غلظت 0/8 میلیگرم در لیتر نیترات نقره و 0/02 میلیگرم در لیتر تیدیازرون بیشترین میانگین جنین در هر قطعه به دست آمد. در ژنوتیپ تبریز بیشترین درصد قطعه جنین زا در غلظت 0/4 میلیگرم در لیتر نیترات نقره و 0/04 میلیگرم در لیتر تیدیازرون مشاهده شد و بیشترین فراوانی القای جنین در 0/4 میلیگرم در لیتر نیترات نقره و 0/04 میلی گرم در لیتر تیدیازرون به دست آمد. بیشترین درصد قطعه جنینزا در غلظت 0/4 میلیگرم در لیتر نیترات نقره و 0/04 میلیگرم در لیتر تیدیازرون در ژنوتیپ های سوپر دامینوس و سوپر سلطان مشاهده شد. برای القای اندامزایی تاثیر غلظت 1/5 درصد و 3 درصد ساکارز، غلظت های 0/2 و 0/4 میلیگرم در لیتر BA و 0/02 و 0/04 میلیگرم درلیتر NAA بر جنینها بررسی شدند. تیمارهای اعمال شده تاثیری بر بلوغ جنین و القای اندامزایی نداشتند.
- Abstract
- Haploid plants predominantly originate from meiotically reduced tissue that undergoes embryogenesis without fertilization. In conventional breeding programs, pure lines developed after several generations of selfing and may not be 100% homozygous. But can be achieved pure lines by haploids methods in short time. Many factors are effective on response to gynogenesis in cucumber. Including genotypes, hormones, ovaries developmental stage and medium, which were studied in this study. This research was carried out in three separate experiments. First experiment; in this experiment to determine the best medium for induction, two MS medium and CBM in a factorial experiment based on completely randomized design were compared. The genotype (Isfahan, Tabriz, Supr damynus and super Sultan) as the first factor and the second factor was medium. The second experiment, this experiment to compare two harvest time was 12 hours before anthesis and during anthesis. The third experiment, to study the effect of different concentrations of thidiazuron (0, 0. 02, and 0. 04 mg per liter) and silver nitrate (0, 0. 4 and 0. 8 mg per liter) a factorial experiment in a completely randomized design was carried out. Effect of 1. 5% and 3% sucrose concentrations and also 0. 2 and 0. 4 mg per liter BA and 0. 02 and 0/04 mg l NAA concentrations on embryos Organogenesis induction was examined. In the first experiment, there was no significant difference in the media. MS medium were used for next experiments. Results of second experiment variance analysis showed that interaction of of genotype and harvest time was not significant and the effect of genotype was not significant too. But the effect of harvest time for all three traits evaluated (frequency induction embryo, embryo average per slice and embryogenic slice percent) was significant. The harvested ovaries at 12 hours before anthesis the had produced embryos. At 3th experiment the interaction of genotype, thidiazuron and silver nitrate for traits were significant. To find out effect of different concentrations of silver nitrate and thidiazuron in each genotype were analyzed separately. Analysis of variancein Isfahan genotype showed that the interaction of silver nitrate and thidiazouron have a significant effect on the embryo average in each slice. The Isfahan genotype of silver nitrate at a concentration of 0. 8 mg/l and 0. 02 mg/l thidiazouron per piece showed the highest average embryo. For the Tabriz genotype interaction of silver nitrate and thidiazuron have a significant effect on embryo and induce many of the pieces, and the highest percentage of embryogenic embryogenic piece at a concentration of 0. 4 mg/ l silver nitrate and 0. 04 mg/l. The highest induction frequency thidiazouron at 0. 4 mg/l silver nitrate and 0. 04 mg/l thidiazouron respectively. The highest percentage of embryogenic slice at a 0. 4mg/l silver nitrate and 0. 04mg/l thidiazouron was observed in Super Damynus and Super sultan genotype. Organogenesis induction treatments did not have effect on maturity of the embryos. Key words: Emberyogenesis, Gynogenesis, Haploidy, SilverNitrat and Thidiazeroun