عنوان پایان‌نامه
بررسی عملکردWnt۱۱ دربقا.مهاجرت وچسبندکی دودمان سلولی سرطان تخمدان انسانی Skov۳
- رشته تحصیلی
- زیست‌شناسی-علوم جانوری -فیزیولوژی جانوری
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه پردیس علوم شماره ثبت: 4936;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 56350
- تاریخ دفاع
- ۰۴ بهمن ۱۳۹۱
- دانشجو
- هاجر رضوانی
- استاد راهنما
- قمرتاج حسین
- چکیده
- سرطان تخمدان به عنوان یکی از شایع ترین و کشنده ترین سرطان ها در جامعه زنان بوده که به علت تشخیص دیر رس آن به عنوان قاتل خاموش شناخته شده است. تحقیقات انجام شده بیان پروتیین Wnt11 در دودمانهای سلولی سرطان تخمدان را نشان داده است. . دودمان سلولی سرطان اپی تلیالی تخمدان از نوع سروزی SKOV3، در این تحقیق مورد استفاده قرار گرفته است. این سلولها با Wnt11 SiRNA ترنسفکت شده و سپس تأثیر کاهش بیان پروتئین Wnt11 روی بقا، چسبندگی ، مهاجرت و تهاجم دودمان سلولی SKOV3 بررسی شده است. نتایج حاصل از وسترن بلاتینگ، کاهش 50 درصدی را در مقدار بیان پروتئین Wnt11 در سلول های ترنسفکت شده با siRNA در مقایسه با سلول های کنترل که فقط ناقل لیپیدیک را دریافت کردند نشان داده است. تست MTT در دوز 50nM از siRNA و در غیاب سرم افزایش معنی دار بقای سلول ها به میزان %47 را در سلول های تیمار شده نسبت به کنترل نشان داد. چسبندگی سلولها در حضور و غیاب ماتریژل مورد در زمانهای 15 و 30 دقیقه مورد بررسی قرار گرفت. افزایش چسبندگی سلولهای ترنسفکت شده نسبت به سلول کنترل در چاهکهای پوشش داده شده با ماتریژل در زمان 15 دقیقه مشاهده شد (%63 در مقایسه با %37 در کنترل). بررسی مهاجرت و تهاجم نشانگر افزایش معنی دار چهار برابری مهاجرت در سلولهای ترنسفکت شده نسبت به کنترل بوده است (P0.01). هم چنین کاهش تعداد سلولهای متهاجم در سلولهای ترنسفکت شده نسبت به کنترل دیده شد )%30 در سلولهای ترنسفکت در مقایسه با %100 در کنترل (P.001 دیده شد. نتایج حاصل، پیشنهاد کننده نقش Wnt11 در بقا، مهاجرت و تهاجم سلول های سرطانی SKOV3 می باشد که بررسی های مولکولی بیشتر این مطلب را تائید خواهد کرد. واژه های کلیدی : سرطان تخمدان، SKOV3، Wnt11، ، بقا، چسبندگی، مهاجرت، تهاجم.
- Abstract
- Ovarian cancer is the most common and lethal cancer in women. It is known as the silent killer due to lack of symptoms in the early stage of this cancer. Previous reports demonstrated alteration of Wnt signaling in ovarian cancer as Wnt11 was shown to be expressed in ovarian cancer cell lines. However, the role of Wnt11 in epithelial ovarian cancer remains unknown. In this study, we sought to determine the role of Wnt11 on survival, adhesion, migration and invasion of ovarian cancer Skov3 cell line by using SiRNA Wnt11. Skov3 cell line was transfected with SiRNA Wnt11 with lipofectamine 2000 or SiPORT as transfection reagent. After 48 hours post-transfection Wnt11 expression was assessed with qRT-PCR and western blot. In parallel, survival/proliferation of transfected cells was assessed by using MTT test. For adhesion, migration and invasion test, first cells were transfected with SiRNA Wnt11 and after 48h were trypsinized and seeded for these tests. Our results showed significant increased cell survival in transfected cells compared to control in the absence of serum (147% versus 100% in control). Although not significant, similar effect was observed in the presence of serum. In addition, decreased Wnt11 expression by 50% with 150 nM SiRNA Wnt11 was observed as revealed by western blot. Adhesion of transfected cells was increased compared to control after 15 minutes post seeding in coated wells with thin layer of matrige (63% versus 37% in control). Migration and invasion test showed significant increased migration by 4-fold in transfected cells compared to control (P<0.01). Moreover, significant decreased number of invaded cells in transfected cells through transwells compared to control was observed (30% in transfected cells compared to control, P<0.001). These data may suggest a significant role of Wnt11 in survival, and migration/invasion in ovarian cancer which needs further molecular investigation. Key words: Ovarian cancer, Wnt11, SKOV3, Cell survival, Adhesion, Migration, Invasion.
