عنوان پایان‌نامه
جداسازی و توالی یابی پرو موتور ژن (CPR)دخیل در بیوسنتز آرتمیزینین در درمنه
- رشته تحصیلی
- مهندسی کشاورزی -بیوتکنولوژی کشاورزی
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه مرکزی پردیس کشاورزی و منابع طبیعی شماره ثبت: 5448;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 58841
- تاریخ دفاع
- ۰۸ بهمن ۱۳۹۱
- دانشجو
- قربان پورابراهیم
- استاد راهنما
- منصور امیدی, عبدالهادی حسین زاده
- چکیده
- مالاریا یکی از مهم ترین بیماری های عفونی است که سالانه 500-300 میلیون نفر به این بیماری مبتلا شده و حدود یک میلیون نفر سالانه بر اثر این بیماری از بین می روند. عامل این بیماری برخی از گونه های انگلPlasmodium sp.است. یکی از مهم ترین مشکلات استفاده از داروهای رایج برای درمان این بیماری مقاوم شدن انگل به این داروها می باشد بنابراین استفاده از منابع جدید دارویی ضروری می باشد. آرتمیزینین یکی از ترکیبات بسیار موثر علیه مالاریا است که از گیاه درمنه (annuaArtemisia)استخراج می گردد. مسیر سنتز آرتمیزینین به خوبی شناخته شده است. ژن CPRیکی از مهم ترین ژن های درگیر در مسیر سنتز آرتمیزینین است که در دو مرحله به همراه ژن CYP71AV1در واکنش های اکسداسیون-احیا شرکت می کند. شناسایی توالی تنظیمی این ژن کمک بسیاری به استفاده از محرک ها برای افزایش تولید آرتمیزینین در گیاه می کند. در این تحقیق با استفاده از روشواکنش زنجیره ای پلیمراز نامتقارن دمایی (TAIL-PCR) ناحیه بالادست ژن CPRجدا شد و پس از کلون شدن در ناقل pGEMT-Easy توالی یابی گردید. آنالیزهای بیوانفورماتیکی سبب شناسایی چندین ناحیه تنظیمیعملکردی نظیر TATA box ، CAAT box ، W box و G boxدر پروموتر جدا شده گردید. توالی به دست آمده در بانک اطلاعاتی GenBank با شماره دسترسی KC243135ثبتگردید.
- Abstract
- Malaria, an infectious diseases, causes in almost one million deaths each year over the world. Artemisinin, a sesquiterpene lactone endoperoxide, is one of the most effective antimalarial drugs purified from Artemisia annua L in China, 1970s. Cytochromep450reductase (CPR) is one of the key enzymes that plays an important role in artemisinin synthesis pathway. We used Thermal Asymmetric Interlaced Polymerase Chain Reaction (TAIL-PCR) to isolate the unknown 5' flanking region of the CPR gene from Artemisia annua. The 5? flanking sequence of CPR was also cloned in pGEMT-Easy vector and sequenced. Subsequent sequence analysis for characterize functional motifs using bioinformatics software indicated a group of putative cis-acting elements such as TATA box, CAAT box, G box, W box inside theCPR promoter. This sequence was submitted in in GenBank databases under the accession numberKC243135.Characterization of cis-acting response elements can facilitate artemisinin enhancement in plantusing elicitors.
