عنوان پایان‌نامه
مطالعه اثر مکمل کروم بر الگوی بیان ژن استیل کوآنزیم آکربوکسیلاز ( (ACAC-a) در بزغالههای نژاد مهابادی
- دانشجو
- محمدجواد نجف پناه
- استاد راهنما
- مصطفی صادقی
- رشته تحصیلی
- علوم دامی -ژنتیک و اصلاح نژاد
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه مرکزی پردیس کشاورزی و منابع طبیعی شماره ثبت: 5176;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 56451
- تاریخ دفاع
- ۰۸ بهمن ۱۳۹۱
- چکیده
- استیل کوآ کربوکسیلاز آلفا، آنزیم محدود کننده سرعت بیوسنتز اسید چرب می¬باشد که توزیع بافتی گسترده¬ای دارد و استیل کوآ را به مالونیل کوآ تبدیل می¬کند. کروم سه ظرفیتی(Cr3+)، به عنوان جزء فعال عامل تحمل گلوکز(GTF) شناسایی شده است. کروم روی هورمون انسولین در جذب گلوکز توسط بافت¬های چربی موثر است. در این مطالعه اثر مکمل کروم-متیونین را بر بیان ژن کد کننده استیل کوآ کربوکسیلاز آلفا که نقش کلیدی در تنظیم و متابولیسم بیوسنتز اسید چرب در پستانداران است بررسی شده است. بدین منظور، 24 رأس بزغاله بومی مهابادی 4 تا 5 ماهه با میانگین وزن زنده 2±22 کیلوگرم انتخاب شده و با توجه به وزن زنده بطور تصادفی به یکی از 4 تیمار غذایی اختصاص داده شدند. بزغاله¬ها به صورت جداگانه در قفس انفرادی نگهداری و به مدت 10 روز با جیره عادت¬دهی و 90 روز با جیره¬ی آزمایشی، تغذیه شدند. تیمار¬های آزمایشی شامل 3 سطح از مکمل کروم (5/0، 1 و 5/1 میلی¬گرم در روز) به¬علاوه جیره پایه و همچنین یک تیمار شاهد بدون مکمل کروم بود. پس از دوره 90 روزه، حیوانات به کشتارگاه انتقال یافته و بلافاصله پس از کشتار از بافت¬های کبد، چربی احشایی، چربی زیرپوستی و ماهیچه¬ی راسته نمونه¬برداری شده و در نیتروژن مایع ذخیره و سپس به دمای 80- درجه سانتیگراد منتقل گردید. پس از استخراج RNA و سنتز cDNA، با استفاده از آنزیم DNase، DNA ژنومی حذف گردید. آغازگرها توسط نرم افزار Primer3Plus طراحی و بیان نسبی ژن¬ ACACA با انتخاب ژن کنترل HSP-90 به روش 2-??Ct با استفاده از دستگاه ترموسایکلر Bio-Rad iQ5 در هر 4 بافت انجام گردید. پس از تجزیه و تحلیل داده¬ها مشخص شد سطح بیان ژن استیل کوآ کربوکسیلاز آلفا در بافت کبد، چرب احشایی و چربی زیرپوستی بطور معنی¬داری (P<0.05) در تیمار کروم سطح 5/1 میلی¬گرم در روز نسبت به تیمار شاهد، کاهش یافت. همچنین، سطح 1 میلی¬گرم کروم نسبت به تیمار شاهد بیان ژن ACACA را در بافت چربی احشایی کاهش داد. شایان ذکر است که هیچ¬گونه تفاوت معنی¬داری بین تیمارها در بافت ماهیچه راسته مشاهده نشد. این مطالعه نشان می¬دهد، تنظیم بیان ژن استیل کوآ کربوکسیلاز آلفا با استفاده از کروم می¬تواند روند اصلی بیوسنتز اسیدهای چرب در بافت چربی و کبد را کاهش داده و منجر به بهبود کیفیت لاشه و سلامت دام شود.
- Abstract
- ACAC-? plays a key role in the regulation and metabolism of fatty acid biosynthesis in mammals. It has been found to have a wider tissue distribution than might be predicted by rates of lipogenesis. Trivalent chromium, previously identified as the active ingredient of the glucose tolerance factor (GTF), has been shown to potentiate the effect of insulin on glucose uptake by fat tissue. Here, we investigated effect of Cr-Met supplement on ACAC-? gene expression in four tissues (liver, visceral fat, subcutaneous fat and longissimus lumborum muscle) in goat that treated with Cr3+ as chromium-methionine (Cr-Met) supplement. Twenty four, 4-5 months old male kids of the Iranian native Mahabadi goat (BW=22 ± 2 kg) were used and randomly allocated to one of the four dietary treatments according to live weight. They were individually penned for 10 days adaptation and 90 days feeding period. Studied treatments were included three levels of 0.5, 1 and 1.5 mg/day of Cr3+ plus standard control diet and the fourth treatment was standard control diet without Cr-Met supplement. After 90 days of feeding, the kids were slaughtered and samples taken from the tissues. Total RNA was extracted and first-strand cDNA synthesis was performed. Real-time PCR was performed on iQ5 Bio-Rad system using HSP-90 as a reference gene. Data were analyzed as a completely randomized design using a general linear model (GLM) procedure (SAS). The results showed that there was no significant difference (P>0.05) among treatments in LL muscle. Trend toward of reduction in ACAC-? transcription in lipogenic tissues was related to level of Cr-Met, i.e. when high dose (1.5 mg/day) was used, the more reduction was occurred. Most reduction of transcription was observed in subcutaneous fat. Reduction fat and increasing carcass lean were indicated part of the energy may be spent to synthesis or retention muscle protein instead of fat. Chromium can facilitated the action of insulin and stimulated of insulin receptors that improved energy metabolism, carcass quality and animal health. The results confirmed use of chromium supplements in the treatment of obesity and type II diabetes.
