عنوان پایان‌نامه
اثر بوتیلیتد هیدروکسی تولوئن (BHT) و آلبومین سرم گاوی(BSA) در رقیق کننده منی بر روی انجماد پذیری اسپرم بز »
- رشته تحصیلی
- مهندسی کشاورزی- علوم دامی - فیزیولوژی دام
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه مرکزی پردیس کشاورزی و منابع طبیعی شماره ثبت: 4608;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 51175
- تاریخ دفاع
- ۱۲ دی ۱۳۹۰
- دانشجو
- حمیدرضا نائیجیان
- استاد راهنما
- احمد زارع شحنه
- چکیده
- فرایند انجماد و ذوب اسپرم شامل در معرض قرار گرفتن ابتدایی اسپرم با مواد محافظ انجمادی، کاهش دما به زیر صفر درجه سانتی¬گراد، ذخیره، ذوب و سرانجام حذف ماده محافظ انجمادی و بازگشت به حالت طبیعی است. این تغییرات باعث آسیب¬های ساختاری و بیوشیمیایی به اسپرم می¬شود که می¬تواند زنده¬مانی و باروری اسپرم را تحت تاثیر قرار دهد. هدف از این پژوهش، بررسی اثر غلظت¬های مختلف بوتیلیتد هیدروکسی تولوئن (0، 5/0، 1، 2 و 4 میلی¬مولار) و آلبومین سرم گاوی (0، 5/2، 5، 10، 15 و 20 میلی¬گرم) در رقیق¬کننده پایه تریس- زرده تخم¬مرغ- فروکتوز (همراه با 5 درصد گلیسرول) پس از فرایند انجماد و یخ‌‌گشایی می¬باشد. برای انجام این تحقیق، 4 راس بز نر بالغ انتخاب شده و اسپرم¬گیری با واژن مصنوعی انجام گرفت. جنبایی، جنبایی پیشرونده و ویژگی¬های حرکتی اسپرم با کمک سیستم آنالیز رایانه‌ای اسپرم اندازه¬گیری شد. ویژگی‌های زنده‌مانی، یک¬پارچگی غشا و اسپرم با مورفولوژی غیرطبیعی نیزبه روش رنگ¬آمیزی اندازه¬گیری شد. نتایج حاصل از این آزمایش نشان داد که رقیق¬کننده اسپرم بز حاوی 1 میلی¬مولار بوتیلیتد هیدروکسی تولوئن در مقایسه با گروه شاهد موجب بهبود معنی¬داری در درصد جنبایی، جنبایی پیشرونده و زنده¬مانی شد (05/0p<). سطوح مختلف بوتیلیتد هیدروکسی تولوئن اثری روی مورفولوژی و یکپارچگی غشای اسپرم نداشتند (05/0p>). غلظت 10 و 15 میلی¬گرم آلبومین سرم گاوی در مقایسه با گروه شاهد بیشترین درصد جنبایی، جنبایی پیشرونده (05/0p<) و زنده¬مانی (05/0p<) را دارا بودند. سطوح مختلف آلبومین سرم گاوی موجب کاهش اسپرم با مورفولوژی غیرطبیعی شدند که معنی-دار نبود (05/0p>). همچنین هیچ¬یک از سطوح آلبومین سرم گاوی نتوانست باعث تغییرات معنی¬دار در میزان یکپارچگی غشای اسپرم گردد. مطابق با نتایج این پژوهش به نظر می¬رسد که افزودن سطح 1 میلی¬مولار بوتیلیتد هیدروکسی تولوئن و یا 10 میلی‌گرم آلبومین سرم گاوی به رقیق¬کننده¬های انجماد اسپرم بز باعث بهبود معنی¬دار پارامترهای اسپرم از جمله تحرک و زنده¬مانی اسپرم می?شود.
- Abstract
- Sperm freezing is an important technique which is widely used for long term storage of sperm. However, this technique induces partially irreversible damages to sperm. These damages can deteriorate anatomical, biochemical and structural organs in sperm. One the other hand, Oxidative damage to sperm resulting from reactive oxygen species generated by the cellular components of semen is one of the main causes for the decline in motility and fertility of sperm during the freeze–thawing process. Therefore, the first aim of sperm-freezing protocols is use of cryoprotectant agents in freezing medium in order to prevent lethal intracellular ice crystal formation and to reduce membrane damage during freezing-thawing. The aim of this study was to evaluate the effects of different concentration of Butylated hydroxytoluene (0, 0.5, 1, 2 and 4 mM) and Bovine Serum Albumin (0, 2.5, 5, 10, 15 and 20 mg) in extenders based on tris and egg yolk on the sperm after freezing-thawing. Ejaculates were collected from four matured goat and then pooled and evaluated at 33 ?C. finally the pooled sperm was freezed acoording to the standard procedure. The sperm parameter includes motility and progressive motility were assessed bye CASA. Viability, membrane integrity and abnormality were assessed respectively by HOST, Eosin-Nigrosin and Hankok Test. The results of this experiment show that addition of 1mM Butylated hydroxytoluene and 10 mM Bovine Serum Albumin to the extender for freezing of goat semen can improve significantly motility, progressive motility and viability. Membrane integrity and abnormality was not significantly affected bye the concentration of Butylated hydroxytoluene and Bovine Serum Albumin. Therefore, we conclude that the optimum concentration of BHT and BSA for cryopreservation of goat semen is respectively 1 mM and 10 mg.
