عنوان پایان‌نامه
مطالعه اثر میدان الکترومغناطیس فرکانس پایین (elf-emf )بر روی برخی از خصوصیات مورفولوژیکی و بیوشیمیایی سلولهای سرطانی t۴۷d
- رشته تحصیلی
- بیوشیمی
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه مرکز تحقیقات بیوشیمی و بیوفیزیک شماره ثبت: 10462ب;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 38930
- تاریخ دفاع
- ۲۰ مهر ۱۳۸۷
- دانشجو
- رزمین صادقی پور
- استاد راهنما
- شهین احمدیان
- چکیده
- تحقیقات نشان داده است که میدانهای الکترومغناطیس فرکانس پایین می توانند باعث تغییرات در رشد، تمایز ، نسخه برداری DNA و بیان پروتئین ها شوند. با توجه به اینکه فیلامان اکتین به عنوان هدفی مهم در چندین داروی شیمی درمانی بوده و نقش اساسی در تشکیل اسکلت سلولی داراست، این تحقیق با هدف بررسی اثر میدان الکترومغناطیس با فرکانس ??? و ??? هرتز و شدت میدان mT ?/. برروی رشد سلولی و توزیع و ساختار و بیان اکتین در سلولهای سرطانی T47D انجام شد. همچنین اثر میدان بر روی DNA هسته، تولید رادیکالهای آزاد و مورفولوژی سلول مورد بررسی قرار گرفت. تکثیر سلولی در زمانهای 24 و 48 و 72 ساعت با استفاده از تریپان بلو و لام نئوبار، توزیع و تغییرات ساختاری اکتین با استفاده از ایمونو فلوروسنس و آنتی بادی N ـ ترمینال ضد اکتین و میزان بیان اکتین با استفاده از ایمونو بلات مورد بررسی قرار گرفتند. همچنین الکتروفورز DNA و مقایسه میزان رادیکالهای آزاد تولید شده با استفاده از فلوسایتومتری صورت گرفت. اعمال میدان باعث افزایش حضور اکتین در نواحی اطراف هسته و همچنین باعث فروپاشی شبکه اکتینی در همه بازه های زمانی ??? هرتز شد، اما این فروپاشی در فرکانس ??? هرتز بیشتر به بازه زمانی ?? ساعت محدود گردید، ضمن اینکه در این بازه زمانی افزایش حجم فیبرهای اکتینی مشاهده شد. تولید رادیکالهای آزاد در هر دو فرکانس مورد مطالعه افزایش یافت، اما در فرکانس ??? هرتز در فاصله زمانی ?? ساعت افزایش چشمگیرتری داشت، همچنین میدان بر روی DNA، مورفولوژی هسته و اندامکها اثری بر جای نگذاشت. جمع بندی مشاهدات نشان دهنده این مطلب است که اعمال میدان با خصوصیات مزبور اگرچه باعث فروپاشی شبکه اکتینی و افزایش رادیکالهای آزاد درون سلول می گردد، اما قادر به شروع آپوپتوز در سلولهای T47D ، در بازه های زمانی مورد مطالعه نمی باشد.
- Abstract
- It has been shown that ELF-EMF can cause changes in cell proliferation, differentiation, cell cycle, apoptosis, DNA replication and expression. With respect to increasing research in therapeutic and destructive aspects of the magnetic field and regarding to actin microfilament as a target for several chemotherapy drugs, this study focused on the effects of electromagnetic field of 0.2 mT field intensity and 100 and 217 HZ frequency on the cell proliferation and actin disruption and reorganization in human breast ductal carcinoma cells (T47D). The effect of ELF-EMF on DNA and level of ROS have been also determined. The effects of applied field were analyzed after 24, 48 and 72 h of exposure. In such affected and control cells the proliferation was determined by trypan blue and actin microfilament was estimated by immunofluoresence microscopy using actin N-terminal antibody following FITC Conjugated secondary antibodies. Immunoblot assay was carried out using actin N-terminal antibody and alkaline phosphatase and its substrate. Cell proliferation showed no effects of exposure to ELF in both control and affected cells. Immunofluoresence microscopy of control cells revealed a highly nonhomogeneous within the cytoplasm and marginalized below cell membrane, but fluorescence from FITC labeled actin filament in 72 h exposed samples caused disruption of actin cytoskeleton and an increase in its level in cytoplasm and around the nucleus in %80 of cells. We suggest that ELF-EMF (B= 0.2 mT and 217 HZ) exposure has mean influence on cell proliferation during 24-72h, but certain changes could be observed on the level of cytoskeleton. We also suggest that ELF-EMF increase the level of ROS in cells but has no effect on DNA fragmentation nor on nuclear morphology, chromatin condensation or formation of apoptotic bodies. Moreover, our data indicated that, ELF-EMF with these properties can induce destruction and reorganizations of actin cytoskeleton but it would not be sufficient
