عنوان پایان‌نامه
بررسی تاثیر سالمونلا انتریکا تحت گونه انتریکا سرووار تیفی موریوم بر فعالیت مونوسیت های شبه ماکروفاژ خون طیور در شرایط برون تن
- رشته تحصیلی
- پاتولوژی
- مقطع تحصیلی
- دکتری عمومی
- محل دفاع
- کتابخانه دانشکده دامپزشکی شماره ثبت: 3693;کتابخانه دانشکده دامپزشکی - مخزن مرد آباد شماره ثبت: 3693;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 81542;کتابخانه دانشکده دامپزشکی شماره ثبت: 3693;کتابخانه دانشکده دامپزشکی - مخزن مرد آباد شماره ثبت: 3693;کتاب
- تاریخ دفاع
- ۲۰ شهریور ۱۳۹۶
- استاد راهنما
- جلیل مهرزادسلاکجانی, رامک یحیی رعیت
- دانشجو
- سحر رستمی
- چکیده
- سالمونلا انتریکا سرووار تیفی‌موریوم از مهم‌ترین و بیماری‌زاترین سالمونلاهای انسان و حیوانات بوده که باعث کاهش تولید و متعاقبش خسارات اقتصادی فراوان در صنعت پرورش طیور می‌شود. با توجه به بیمارگری داخل سلولی باکتری سالمونلا و نقش مهم مونوسیت‌ها و ماکروفاژها در از بین بردن آن، قدرت بقای سالمونلا انتریکا در این سلول‌های ایمنی ذاتی از فاکتورهای مهم حدت سالمونلوز محسوب می‌شود. هدف از این پژوهش مطالعه اثر باکتری سالمونلا انتریکا سرووار تیفی‌موریوم بر مونوسیت‌های شبه ماکروفاژ خون طیور در شرایط آزمایشگاهی و ارایه روش کاری مناسب در مورد کشت و مواجه سلول‌های فاگوسیت کننده پرندگان با سالمونلا می‌باشد، که می‌تواند زمینه‌ای برای انجام پژوهش‌های علمی بیشتر در حیطه واکنش‌های متقابل میزبان- پاتوژن باشد. برای بررسی این مهم، پس از خون گیری از مرغ‌های گوشتی سالم دو تا سه هفته، مونوسیت‌های شبه ماکروفاژ هموژن از خون محیطی جداسازی و کشت داده شد. پس از بررسی کمی-کیفی مونوسیت‌های شبه ماکروفاژ جدا شده با میکروسکوپ و فلوسایتومتری، سلول‌ها در دو گروه کنترل (بدون باکتری) و تیمار (با باکتری سالمونلا انتریکا سرووار تیفی‌موریوم از جدایه‌های کلینیکی) به نسبت یک به 50 چالش داده شدند. بررسی آسیب سلولی- مولکولی ناشی از سالمونلا در مونوسیت‌های شبه ماکروفاژ با روش‌های فلوسایتومتری، لومینومتری (کمی‌لومینسانس، اندازه گیری رادیکال‌های آزاد) و بیولومینسانس (اندازه‌گیری کاسپازهای 3 ،7 ،9 و ATP) صورت گرفت. علاوه بر بروز تغییرات در الگوی فلوسایتومتری مونوسیت‌های شبه ماکروفاژ، افزایش چشمگیری در فعالیت کاسپازهای 3 ،7 و 9 همراه با تخلیه ATP در سلول‌های مواجهه با سالمونلا مشاهده گردید. نتایج حاصل از این پژوهش حاکی از آن است که باکتری سالمونلا انتریکا سرووار تیفی‌موریوم باعث تضعیف مونوسیت‌های شبه ماکروفاژ طیور بویژه از طریق القای آپوپتوز می‌شود. این یافته‌ها پنجره جدیدی به روی جنبه‌های مولکولی واکنش‌های متقابل سالمونلا - ماکروفاژ و پاتوژنز سالمونلوز در حیوانات بویژه پرندگان برای پژوهشگران می‌گشاید.
- Abstract
- One of the most important and pathogenic Salmonella in Human and animal is Salmonella enterica serovar Typhimurium that causes reduce in production and substantial economic losses in poultry industry. Due to the fact of Salmonella being an intracellular pathogen, monocytes and macrophages have important role in killing this bacteria, survival ability of Salmonella enterica in these innate immune cells is one of the Salmonella virulence factors. The aim of this study is to investigate the effect of Salmonella enterica serovar Typhimurium on the functions of avian blood macrophage-like monocytes in vitro and provide the appropriate experimental models on cell culture and challenge of avian phagocyte cells to Salmonella, which might open new door on cellular- molcular aspects of avian host- pathogen interreactions.. To do this, after blood sampling from healthy 2-3 weeks old broilers, homogeneous macrophage-like monocytes were isolated and cultured from peripheral blood mononuclear cells. After quantitative and qualitative evaluation of macrophage-like monocytes with microscope and flow cytometry, the cells were challenged with the ratio of one to 50 in two groups, control (without bacteri) and treatment (with Salmonella enterica serrovar Typhimurium from clinical isolates). Cellular-molecular damage caused by Salmonella in macrophage-like monocytes was assessed with flow cytometry, luminometry (chemi-luminescence, measuring total free radicals), bioluminescence (measuring caspases 3 ,7, 9 and ATP). In addition to the pattern changes in flow cytometry, high increase was observed in caspase 3,7, 9 activity and ATP depletion in challenged cells with Salmonella. The result of this study indicates that Salmonella enterica serovar Typhimurium weakens macrophage-like monocytes particularly through apoptosis. These findings opens new window for researchers to conduct more research on the molecular aspect of Salmonella- macrophage interactions and pathogenicity of salmonellosis and other bacterial diseases in animals especially avian.
