عنوان پایان‌نامه
مقایسه مولکولی جرایدهای مختلف آسپرژیلوس فومیگاتوس با توجه به بیان ژن
- رشته تحصیلی
- دامپزشکی
- مقطع تحصیلی
- دکتری عمومی
- محل دفاع
- کتابخانه دانشکده دامپزشکی شماره ثبت: 3438;کتابخانه دانشکده دامپزشکی - مخزن مرد آباد شماره ثبت: 3438;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 57027
- تاریخ دفاع
- ۲۸ بهمن ۱۳۹۱
- دانشجو
- گل ناز شرفی
- استاد راهنما
- علیرضا خسروی, رامک یحیی رعیت
- چکیده
- آسپرجیلوس فومیگاتوس قارچی ساپروفیت می باشد که کنیدی های آن در فضا پراکنده می باشد. این قارچ تحمل گرمائی بالائی دارد و در دمای oC 20 تا بالاتر از oC 50 نیز توانائی رشد دارد و در افراد دارای نقص سیستم ایمنی و همچنین افرادی با سابقه آلرژی می تواند بیماری زا باشد. یکی از مهمترین ژن ها که در شرایط استرس زا باعث محافظت میکروارگانیسم ها می شود، ژن کد کننده پروتئین شوک حرارتی می باشد که در این مطالعه مورد بررسی قرار گرفت. در مطالعه حاضر نوزده جدایه آسپرجیلوس فومیگاتوس در دماهای C o 20، oC 30، oC 37 و oC 42 کشت داده شدند پس از پنج روز استخراج RNA با روش TRizol انجام شد، پس از ساخت cDNA با روش RT-PCR واکنش multiplex PCR با دو جفت پرایمر HSP70 و ?-tubulin انجام گرفت . نتایج حاصل از این مطالعه نشان دهنده بیان بیشتر ژن HSP70 با افزایش دما بود، همچنین سویه های جدا شده از نمونه های بالینی نسبت به سویه های جدا شده از نمونه های غیر بالینی بیان ژنی بیشتری را نشان می دادند که نشان دهنده دخالت این ژن در حدت زائی این میکروارگانیسم است.
- Abstract
- Aspergillus fumigatus is a filamentous fungi with ubiquitous in the environment distributed all over the world. It is also a human pathogen and induces allergic responses, negatively impacting health care and associated costs significantly around the world. As a termotolerant fungus, A. fumigatus has capability of growth at temperatures that approach the upper limit for all eukaryotes. Termotolerance of this fungus plays a critical role in inducing Mammalian and Avian infections. Among the genes, one of the important genes is that codes the production of Heat Shock Proteins (HSPs), HSPs has been identified as molecular chaperones conserved between microbes and human. In the present study, the expression of HSP70 gene was investigated in different isolates of A. fumigatus in response to various temperatural challenges such as 20? C , 30? C , 37? C and 42 ? C . For this reason, different strains of A.fumigatus were cultured in saboraud glucose agar and incubated in 25 oC. After 5 days they were cultured in saboroud glucose broth and incubated in 20? C , 30? C , 37? C and 42 oC for 5 days. DNAs and RNAs of all samples were extracted by isoamyloalchohol-chloroform and TRizol method, respectively. All the samples were assayed using RT-PCR method by specific HSP70 primers and ?-tubulin was used as a house keeping gene that is expressed in all conditions, as well. Regarding to obtainal results, it seems that the expression of HSP70 in upper temperatures was stronger than lower ones in all the strains. Also the strains in which obtained from clinical samples showed stronger expression of HSP70 gene than samples isolated from feed or air. In order to increase our knowledge with response to expression of HSP70 gene in different conditions, this study should be continued into the future using more isolates from different origins such as animal and human samples and environmental specimens.
