عنوان پایان‌نامه
ارزیابی عملکرد اسکافولد نانوکامپوزیت هیدروکسی آپاتیت و هیدروکسدوز دو لایه
- رشته تحصیلی
- دامپزشکی
- مقطع تحصیلی
- دکتری عمومی
- محل دفاع
- کتابخانه دانشکده دامپزشکی شماره ثبت: 3440;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 57047;کتابخانه دانشکده دامپزشکی - مخزن مرد آباد شماره ثبت: 3440
- تاریخ دفاع
- ۰۶ اسفند ۱۳۹۱
- دانشجو
- فرزانه خانی
- استاد راهنما
- محمدمهدی دهقان
- چکیده
- در این مطالعه از 18 سر خرگوش نیوزلندی سفید بالغ، نر و سالم از لحاظ بالینی استفاده شد. حیوانات در 3 گروه 6 تایی شامل: گروه کنترل: ایجاد نقیصه استخوانی با اندازه بحرانی، بدون هیچگونه درمان. گروه داربست تنها: ایجاد نقیصه استخوانی با اندازه‌ی بحرانی و پر کردن محل نقیصه با استفاده از داربست LDH/HA. گروه آزمایش: ایجاد نقیصه استخوانی با اندازه‌ی بحرانی و پر کردن محل نقیصه با استفاده از داربست LDH/HA همراه با سلول‌های بنیادی مزانشیمی مشتق از چربی، مورد بررسی قرار گرفت. اخذ نمونه چربی تحت بیهوشی عمومی از ناحیه بین دو کتف انجام شد. نمونه چربی پس از شست و شو و خرد شدن به ذرات کوچکتر، در مجاورت کلاژناز قرار گرفته، سانتریوفوژ شده و به فلاسک ها منتقل و انکوبه شدند. تعویض محیط کشت هفته ای دو بار صورت گرفت و پس از تلاقی سلول ها گسترش داده شده و در نهایت بر روی داربست ها کشت شدند. جراحی تحت بیهوشی عمومی با ایجاد نقیصه بر روی استخوان رادیوس چپ و قرار دادن داربست حاوی سلول در گروه آزمایش، داربست در گروه کنترل مثبت و بدون اقدامات درمانی در گروه کنترل منفی صورت گرفت. پس از 12 هفته کلیه حیوانات معدوم شد و از استخوان رادیوس استخراج شده تصاویر رادیوگرافی و همچنین مقاطع هیستوپاتولوژی از ناحیه مورد نظر تهیه شد. بررسی ها و آنالیز های آماری روی نتایج به دست آمده توسط نرم افزارImageJ بر روی تصاویر رادیوگراف و Sigma Scan Pro بر روی تصاویر هیستوپاتولوژی نشان می دهد گروه آزمایش نتایج مطلوب و تفاوت معنی داری نسبت به دو گروه دیگر دارد و داربست LDH/HA باعث هدایت و القای استخوان سازی می شود. همچنین اثرات مثبت و موثر سلول‌های بنیادی مزانشیمی مشتق شده از بافت چربی همراه با داربست سه‌بعدی متخلخل کامپوزیت دوجزیی هیدروکسی آپاتیت / هیدروکسیدهای دوگانه لایه ای در التیام نقیصه‌های استخوانی با اندازه بحرانی ثابت شد.
- Abstract
- Bone defects resulting from trauma and tumor resection are common clinical problems. Bone tissue usually has the ability to regenerate, but when a defect of critical size needs to be bridged, the repair attempt fails in most cases. Massive segmental bone defects often occur following trauma and the repair is not always satisfactory, resulting in delayed union or non-union with considerable morbidity, despite bone’s capacity to heal spontaneously.Massive bone defects constitute a major challenge to reconstructive surgery. Autogenous bone grafting is considered the gold standard for filling bone defects even today, despite significant problems arising from donor-site morbidity and limited amount of donor bone Furthermore, bone grafting may be restricted by the limited supply and significant donor site morbidity. Facing these challenges, one alternative approach exploits the potent osteoinductive properties of stem cell and bone tissue engineering. Therefore, bone regeneration by means of tissue engineering has attracted increasing interest. The concept of tissue engineering is based on three pillars: (1) scaffolds; (2) cells; and (3) growth factors. Eighteen adult New Zealand White, male, healthy rabbits were divided into three groups of six animals in each: The empty group : developed critical size defect with no treatment .The control group: developed critical size defect and fill it with unloaded LDH/HA scaffold. The test group developed critical size defect and fill it with LDH/HA scaffold seeded by Stem Cells. The ASCs were obtained from adipose tissue from the area between scapulas under the general anesthesia. After washing, adipose tissue was cut into small pieces and suspended in PBS, they have been put next to the collagenase type 1, Tissues were placed in a shaking incubator at 37 °C with continuous agitation for 60 min. Following digestion, material was filtered , remove the undigested tissue and the filtrate tissue was centrifuged. Supernatant, containing mature adipocytes, was aspirated and the remaining pellets (ASCs) were washed and resuspended in sterilized PBS. Then transferred to flasks and incubated. The cell culture mediums have been changed in determined times, and the cells are passaged after confluences, and finally the cells have been seeded onto scaffolds. The operations under general anesthesia have been done by creating a critical size defect on left radius and placed scaffold loaded by stem cells in the test group, scaffold in the control group and nothing in the empty group. All animals were sacrificed after twelve weeks, and radiographic pictures were exploited from radius bones, and also histopathology sections were gained from the tissues. The analysis and statistical experiments on radiographic images were done by using the ImageJ software and the histopathology images were analyzed by the Sigma Scan Pro software. The results showed that the repair of radial defects was accelerated by implantation of ASCs seeded onto a LDH/HA scaffold.
