عنوان پایان‌نامه

ارزیابی همبستگی تغییرات پاتولوژیک دستگاه عصبی مرکزی با آلودگی با برخی از ویروس های ایجاد کننده سقط در بره های سقط شده و مرده به دنیا آمده در استان مازندران در طی فصل زایش سال ۹۲-۹۱




    رشته تحصیلی
    پاتولوژی
    مقطع تحصیلی
    دکترای تخصصی
    محل دفاع
    کتابخانه دانشکده دامپزشکی شماره ثبت: 622 ت;کتابخانه دانشکده دامپزشکی - مخزن مرد آباد شماره ثبت: 622 ت;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 75097;کتابخانه دانشکده دامپزشکی شماره ثبت: 622 ت;کتابخانه دانشکده دامپزشکی - مخزن مرد آباد شماره ثبت: 622 ت;
    تاریخ دفاع
    ۱۵ مهر ۱۳۹۴
    استاد راهنما
    سیدحسین مرجانمهر

    این تحقیق در فاصله زمانی اسفند 91 تا اسفند 92 با مراجعه به مناطق مختلف استان مازندران بر روی 650 بره نوزاد, مرده به دنیا آمده و سقط شده مشکوک به اختلالات دستگاه عصبی مرکزی از793 میش آبستن از8گله انجام پذیرفت و نمونه برداری عصبی ضمن مطالعه تغییرات ظاهری به منظور بررسی هیستو پاتولو‍‍‍ژیک نمونه کامل دستگاه عصبی مرکزی(مغز و نخاع)همراه اندامهای احشایی(کبد , عقده های لنفی...) انجام شد و درسپس فرمالین بافر10% پایدار گردید. در این مطالعه، دو روش Real-time PCR و هیستوپاتولوژی در ارزیابی ارتباط بین عوامل آلوده کننده ویروسی و جنین های سقط شده گوسفند به کار برده شدند. روش Real-time PCR برای تشخیص ویروس آکابان روی 75 مورد جنین سقط شده ،ویروس بوردر 75 مورد، بلو تانگ یا زبان آبی 35 مورد و تب دره ریفت 25 مورد انجام گرفت. در این تحقیق برای ارزیابی میکروسکوپیک از بافت های عصبی با توجه به امکانات موجود در دانشگاه، ما تعداد محدودی از جنین های سقط شده را مورد کالبد گشایی انجام دادیم وتعداد 10 نمونه جنین سقط شده انتخاب گردیدند. در ارزیابی ریز بینی مغز ، 14 بخش مختلف همراه با12 بخش مختلف از قطعات نخاعی گردنی، سینه ای، کمری و خاجی مورد مطالعه قرار گرفتند. کلیه یافته های جمع آوری شده از روشهای تشخیصی مختلف باآزمون مربع کای مورد تجزیه و تحلیل آماری قرار گرفتند.در بررسیهای اولیه انجام شده مشخص گردید که در اغلب موارد، آرتروگریپوزیس بعنوان شایع ترین نقایص اسکلتی عضلانی مشاهده گردید و در کالبد گشایی، ناهنجاری های مغز شامل هیدراننسفالی،هیدروسفالی ،پورآنسفالی و هیپوپلازی مخچه، مشاهده شده است.در بررسی مقاطع بافتی تهیه شده از نواحی مختلف دستگاه عصبی مرکزی شامل کورتکس مخ، تالاموس، هیپوکامپ، نواحی اطراف بطنی، مغز میانی، پل مغزی، مخچه، بصل النخاع و قطعات مختلف نخاع در نواحی گردن، سینه، و کمر تغییرات پاتولوژیک بصورت آنسفالیت غیر چرکی همراه با تجمع آستینی وار سلول های آماسی تک هسته ای در اطراف عروق خونی (PVC)، ایجاد حفرات کیستیک از عدم تشکیل بافت عصبی به اندازه های مختلف بصورت پراکنده در قسمت های مختلف بافت عصبی (پورآنسفالی)، ندول گلیال چند کانونی و تغییرات دژنراتیو نورون ها بشکل کروماتولیز مرکزی و نکروز حاد نورونی بصورت پراکنده در نقاط مختلف و بویژه در مورد نخاع نکروز حاد نورونی در شاخ شکمی ( که باعث بروز حالت آرتروگریپوز در بره مبتلا خواهد شد) مشاهده گردید .همچنین تغییر پاتولوژیک قابل توجه در مقاطع بافتی تهیه شده از کـبد بره مبتلا، نکروز تکی (Single cell necrosis) و پراکنده وگسترده سلولهای کبدی بود. و همچنین نتایجReal-time PCR نشان داد که تنها یک نمونه از 75 مورد ویروس بودر مثبت اعلام شد ودر سایر عوامل ویروسی با این روش هیچ مورد مثبتی یافت نشد.آزمون مربع کای انجام گرفته نشان داد که رابطه معنی داری بین پرخونی ، التهاب غیر چرکی ، تورم اکسون ها، نکروز حاد نورونی، پورآنسفالی با آلودگی به ویروس وجود دارد P<0.05)) درحالیکه درمورد مابقی ضایعات چنین رابطه ای با آلودگی به ویروس مشاهده نمی شود و مقادیر Pvalue درسایر موارد از5 درصد ( P>0.05) بیشتر است. در نتیجه،DNA بوردر در مغز جنین یک بره سقط شده گوسفند شناسائی گردید که اولین مورد گزارش حضور این ویروس در ایران می باشد
    Abstract
    From February 2012 to March 2013, a total of 650 aborted fetuses, stillbirths, and newborn lambs from 793 pregnant ewes were studied from 8 flocks at different areas in the Mazandaran province. Following macroscopic examination, brain and spinal cord together with visceral organs (liver, lymph nodes and etc) were removed from each fetus. Thus, tissues collected at necropsy were fixed in 10% neutral-buffered formalin. In this study, both Real-time PCR and histopathological methods were used to assess the association between viral infectious agents and aborted fetuses of sheep. These methods were used for virus detection of Akaban on 75 aborted fetuses, Border virus in 75 cases, Bluetongue in 35 cases, and Rift Valley Fever in 25 cases. Nevertheless, we conducted a limited number of necropsies for aborted fetuses. In current study, according to the facilities available at university, a limited number of aborted fetuses were autopsied for microscopic evaluation of nervous tissue, and 10 samples of aborted fetuses were selected from different regions of Mazandaran province. In microscopic examinations, 14 sections of the brain and 12 sections of the spinal (cervical spinal cord, thoracic, lumbar and sacrum) were studied. All variables were statistically analyzed with chi-square test. Initial studies showed that in the most cases, arthrogryposis was the most common musculoskeletal defects and at necropsy. Moreover, malformations of the brain included hydranencephaly, porencephaly, hydrocephalus and cerebellar hypoplasia were observed. Histopathologic lesions included chronic multifocal lymphoplasmacytic encephalitis(nonsuppurative) with extensive perivascular cuffing in some cases, formation of glial nodules)multifocal gliosis(, neuronal degeneration, necrosis and central chromatolysis, multiple small to large areas of microcavitation mainly in the cerebellar cortex, thalamus, hippocampus, periventricular zone, mesencephalon, pons and cerebellum ,medulla oblongata were observed, as well as, necrosis neurons were observed in the ventral horns of spinal cord and mainly were found in arthrogryposis fetuses. Furthermore, single-cell necrosis and extensive and diffuse necrosis of the liver were observed. Real time PCR results showed that only one of the 75 tested cases was positive for Border virus and other viral agents with this method were not found. Chi-square test showed there was a significant correlation between hyperemia, non-purulent inflammatory, axonal swelling, acute neuronal necrosis, and porencephaly with border virus infection (P<0.05), while the remaining lesions were not seen to be correlated with this virus (P>0.05). In conclusion, DNA border were identified in the fetal brain of an aborted lamb sheep that is the first report of the virus in Iran.