عنوان پایان‌نامه
تهیه واکسن نوترکیب کلی باسیلوز گوساله بر اساس پروتئین اتوترانزپورتر ایکولای و ارزیابی آن در مدل موشی
- رشته تحصیلی
- ایمنی شناسی
- مقطع تحصیلی
- دکتری تخصصی PhD
- محل دفاع
- کتابخانه دانشکده دامپزشکی شماره ثبت: 687 ت;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 78443;کتابخانه دانشکده دامپزشکی - مخزن مرد آباد شماره ثبت: 687 ت;کتابخانه دانشکده دامپزشکی شماره ثبت: 687 ت;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 78443;کتابخانه
- تاریخ دفاع
- ۲۶ دی ۱۳۹۵
- دانشجو
- ریحانه قربانپور
- استاد راهنما
- غلامرضا نیکبخت بروجنی
- چکیده
- مقدمه و ضرورت انجام مطالعه: ایکولای انتروتوکسیژنیک (ETEC) از شایع ترین عوامل اسهال زا در انسان و احشام است. در حال حاظر با وجود اهمیت جهانی این باکتری، واکسنی که بتواند حفاظت گسترده مناسبی علیه آن ایجاد کند، وجود ندارد. بنابراین، مطالعات اخیر در جهت شناسایی پادگن های حراست شده ژنومی ایکولای از جمله پروتئین های اتوترانزپورتر متمرکز شده است. ، ژن هایی که پاتوتیپ ETEC را از ایکولای غیر بیماری زا جدا می کنند محدودند ولی در مسیر تولید واکسن های مؤثر علیه ETEC مهم به شمار می آیند. از آن جمله، ژن کد کننده پروتئین اتوترانزپورتر پادگن 43 (Ag43) است که به دلیل نقش آن در بروز عوامل حدت تجمع سلولی و تشکیل بیوفیلم، هدف ارزشمندی در تهیه واکسن محسوب می?شود. هدف مطالعه: در پژوهش حاضر با بهره گیری از روش‌های تجربی و ایمونوانفورماتیک به بررسی دقیق ساختار پادگنی و ارزیابی ایمنی زایی و حفاظت پروتئین Ag43 سویه 510 ایکولای ETEC جدا شده از گوساله پرداختیم. مواد و روش کار: ابتدا پروتئین نوترکیب دامنه مسافر Ag43 سپس پاسخ ایمنی ناشی از تجویز آن در مدل موشی و در انتها، اثر حفاظتی آن در بچه موش های آلوده ارزیابی گردید. همچنین، خصوصیات فیزیکی- شیمیایی، پایداری، ساختار دوم و سوم پروتئین و اپی توپ‌های ایمنی زا و آلرژن زایی آنها، در مطالعه ایمونوانفورماتیک مورد توجه قرار گرفت. یافته ها: تجویز پادگن نوترکیب دامنه مسافر Ag43 سویه 510 در موش ها، به طور مشخص منجر به افزایش عیار پادتن سرم گردید، درحالیکه اثر حفاظتی در بچه موش های آلوده تنها با کاهش دز چالش مشاهده شد. از سوی دیگر، تعداد 15 قطعه پپتیدی محرک پاسخ یاخته های B و T در این پروتئین شناسایی گردید، که تعداد 9 عدد از آن ها به عنوان پادگن معرفی شدند. نتیجه گیری: نتایج حاصل از این پژوهش حاکی از امکان در نظر گرفتن دامنه مسافر پروتئین Ag43 در تهیه واکسن‌های کلی باسیلوز گاوی است.
- Abstract
- BACKGROUND: Enterotoxigenic E. coli (ETEC) is the most common bacterial cause of diarrhea in human and farm animals. In spite of the global importance of ETEC infections, there is no vaccine available for widespread protection. Recent studies are directed toward recognizing genomic conserved antigens of E.coli, including autotransporter proteins. There are a few genes that distinguish ETEC pathotype from nonpathogenic strains, which are also important in development of efficient vaccine. Antigen 43 (Ag43), an autotransporter protein that causes autoaggregation and biofilm formation, has a low frequency in commensal strains. It is a suitable target in vaccine design. OBJECTIVES: In the current study, we investigated antigenesity, immunization and protection effects of Ag43 obtained from bovine ETEC strain 510, by using experimental and immuno-informatics methods. METHODS: A recombinant passenger domain of Ag43 was prepared and administrated in mice model. Then, the protection effect was evaluated in infected infant mice. Furthermore, the physicochemical properties, the secondary and tertiary structure of protein, the immune epitopes and the allergenicity were analyzed. RESULTS: A significant increased level of serum specific antibodies was observed by injection of the recombinant passenger domain of Ag43 in mice, whereas the protection in infected infant mice was achieved by decreasing of the challenge dose. Indeed, a number of 15 epitopes which induce B and T cell responses were recognized and nine of them introduced as antigens. CONCLUSIONS: The results indicated that the passenger domain of Ag43 protein can be potentially valuable target in development of bovine colibacillosis vaccine.
