عنوان پایان‌نامه
مطالعه اثر برخی فیتواستروژن ها بر شاخص های تولید مثلی و تکامل جنینی ماهی سفید
- رشته تحصیلی
- مهندسی منابع طبیعی - شیلات
- مقطع تحصیلی
- دکتری تخصصی PhD
- محل دفاع
- کتابخانه مرکزی پردیس کشاورزی و منابع طبیعی شماره ثبت: 7173;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 77870;کتابخانه مرکزی پردیس کشاورزی و منابع طبیعی شماره ثبت: 7173;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 77870
- تاریخ دفاع
- ۱۳ آذر ۱۳۹۵
- دانشجو
- داود محمدرضائی
- استاد راهنما
- باقر مجازی امیری
- چکیده
- فیتواستروژن‌ها ترکیباتی طبیعی با ظرفیت تغییر عملکرد یا ساختار سیستم غدد درون ریز و تولیدمثل در آبزیان هستند که در بیشتر محیط‌های آبی یافت می‌گردند. در این تحقیق، اثر دو فیتواستروژن بر برخی شاخص‌های تولید مثلی (بافتی: بافت گناد و لایه کوریون تخمک؛ هورمونی: تستوسترون و 17بتا-استرادیول، یونی: کلسیم؛ آنزیمی: آنزیم آروماتاز و EROD؛ آسیب DNA: متیلاسیون) مولدین و جنین ماهی سفید دریای خزر مورد مطالعه قرار گرفت. تعداد 49 عدد مولد ماده به مدت 21 روز و هم‌چنین تخم لقاح یافته ماهی سفید تا زمان تفریخ، در معرض سه سطح جنیستئین و سه سطح بتاسیتوسترول با غلظت‌های 10، 50 و 500 نانوگرم بر لیتر قرار گرفتند. از خون و بافت ماهیان در پایان آزمایش نمونه برداری انجام شد و فاکتورهای بیان شده بر حسب پروتکل‌های موجود اندازه‌گیری گردید. نتایج نشان داد که سطوح فیتواستروژنی سبب تغییر در ساختار تخمدان مولدین در معرض بتاسیتوسترول شده و زرده سازی داخلی را در غلظت‌های بالا القاء می‌نمایند. این ترکیبات از نظر آماری تاثیری بر درصد لقاح نداشته ولی منجر به کاهش درصد تفریخ و افزایش ضخامت لایه کوریون گردیدند. هم‌چنین غلظت 500 نانوگرم بر لیتر جنیستئین منجر به افزایش سطح هورمون استروژنی 17بتا-استرادیول و فعالیت آروماتازی در مولدین و جنین شد. در حالی‌که هر دو فیتواسترژن بر میزان کلسیم تاثیر معنی‌داری نشان ندادند. علاوه براین سطح بالای بتاسیتوسترول نیز سبب افزایش میزان تستوسترون و فعالیت EROD شد. بررسی متیلاسیون کل ژنوم در بافت‌های کبد، تخمدان و جنین نشان داد که الگوی متیلاسیون در بافت‌های کبد و تخمدان مولدین و هم‌چنین جنین تحت تاثیر ترکیبات آزمایشی تغییر می‌نماید. این تغییر بسته به نوع بافت و ترکیب فیتواستروژنی متفاوت می‌باشد. براساس نتایج، مشخص گردید که حضور جنیستئین و بتاسیتوسترول در محیط آبی می‌تواند بر عملکرد تولید مثل و رشد جنین ماهی سفید خزر با تغییر در شاخص‌های بافتی، هورمونی، آنزیمی و مولکولی تاثیر گذار باشد. از سوی دیگر الگوی این تغییرات بسته به نوع ترکیب فیتواستروژنی متفاوت بوده که ناشی از تفاوت ساختار و سطح اثر دو ترکیب است. بنابراین انتظار می‌رود وجود این ترکیبات با غلظت‌های ذکر شده در رودخانه‌های منتهی به دریای خزر بتواند در دراز مدت بر عملکرد تولید مثلی ماهی سفید و تکامل جنین تاثیر منفی داشته باشد. واژگان کلیدی: فیتواستروژن‌ها، شاخص های تولیدمثل، هورمون‌های استروئیدی، آروماتاز، EROD ، متیلاسیون و ماهی سفید.
- Abstract
- Phytoestrogens are natural compounds with the potential to elicit negative effects on the endocrine systems and reproduction of aquatic life. In this study, the effect of two phytoestrogen compounds on some reproduction indicators of brood stock and embryos of Caspian Kutum (including; histological: ovary and chorion; hormonal: testosterone and 17?-estradiol; ionic: calcium; enzymatic: aromatase and EROD and DNA methylation) were investigated. 49 none-ripened (for about 21 days) and fertilated eggs (until hatching time) of Kutum’s exposed to 3 different levels of genistein and ?-sitosterol (10, 50, 500 ng/l respectively). At the end, serum, liver and ovary were sampled and mentioned parameters were measured according to exist protocols. The results showed high levels of both compound had effect on vitlogenesis and ?-sitosterol changed ovary structure at high level. Although they had no statically effect on fertilization rate but reducing the hatching rate and increasing the chorion thickness. Also, 500 ng/l of genistein lead to increase 17?-estradiol and aromatase activity adults and embryos of Caspian Kutum. While, both of phytoestrogen compounds had no significant effect on Calcuim level. Furthermore, treated fish with high concentration of ?-sitosterol showed high level of testosterone and EROD induction. Study of whole genome methylation on liver, ovary and embryos showed treated fish with 500 ng/l of ?-sitosterol had different methylation pattern. According to this study, genistein and ?-sitosterol could effect on reproduction and embryos development by changing histological, hormonal, enzymatic and molecular indicators. On the other hand, these changes depend on type, structure and level of phytoestrogen compounds. It seems that these compounds could effect on the endocrine system and reducing reproduction performance and embryos development of Kutum in the long period. Keywords: Phytoestrogens, reproduction indicators, Steroid hormones, Aromatase activity, EROD, DNA methylation and Caspian Kutum.
