عنوان پایان‌نامه

اثر ترکیب مشتقات پکتینی و پلی فنل ها بر القا آپوپتوز در دودمان سلولی سرطان سینه انسان و موش (MDA-۲۳۱ و ۴T۱)



    دانشجو در تاریخ ۱۰ تیر ۱۳۹۶ ، به راهنمایی ، پایان نامه با عنوان "اثر ترکیب مشتقات پکتینی و پلی فنل ها بر القا آپوپتوز در دودمان سلولی سرطان سینه انسان و موش (MDA-۲۳۱ و ۴T۱)" را دفاع نموده است.


    رشته تحصیلی
    زیست‌شناسی-علوم جانوری -فیزیولوژی جانوری
    مقطع تحصیلی
    دکتری تخصصی PhD
    محل دفاع
    کتابخانه پردیس علوم شماره ثبت: 6546;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 81391;کتابخانه پردیس علوم شماره ثبت: 6546;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 81391
    تاریخ دفاع
    ۱۰ تیر ۱۳۹۶
    دانشجو
    حسن مقتدری
    استاد راهنما
    حوری سپهری
    چکیده
    لینک فایل چکیده
    پلی‌فنلها (مانند کورکومین و گالیک‌ اسید) و مشتقات پکتینی (مانند آرابینوگالاکتان) در مطالعات سرطان مورد توجه زیادی میباشند. در تحقیق حاضر اثر ترکیب دو ماده ‌پلی‌فنلی کورکومین و گالیک اسید با یک مشتق پکتینی بنام آرابینوگالاکتان بر مهار تکثیر سلولی و القا آپوپتوز در سلول‌های سرطانی سینه مورد بررسی قرار گرفته است. تست MTT نشان داد که ترکیب کورکومین با گالیک اسید و یا آرابینوگالاکتان باعث کاهش معنی‌دار تکثیر سلول‌های سرطانی سینه می‌شود، درحالی‌که اثر معنی‌داری بر رشد سلول‌های سالم بند ناف جنینی HUVEC ندارد. بررسی چرخه سلولی نیز نشان داد که ترکیب این مواد باعث افزایش تعداد سلول‌های ناحیه Sub G1 چرخه سلولی می‌گردد. داده‌های تست انکسین/ PI نشان داد که تعداد سلول‌های آپوپتوزی در گروه ترکیبی افزایش معنی‌داری یافته است. آنالیز وسترن بلات مربوط به پروتئین‌های دخیل در آپوپتوز مشخص کرد که تیمار سلول‌های سرطانی سینه با ترکیب این مواد باعث افزایش سطح پروتئین Bax، فرم شکسته‌شده کاسپاز 3 و PARP می‌شود و همچنین بیان پروتئین ضد‌آپوپتوزی Bcl-2 را کاهش می‌دهد. نتایج نشان داد که ترکیب این مواد با افزایش رادیکال‌های آزاد اکسیژن، کاهش سطح گلوتاتیون و برهم زدن پتانسیل غشای میتوکندری باعث پیشبرد آپوپتوز در سلول‌های سرطانی سینه می‌شود. در بررسی in vivo تزریق هم‌زمان کورکومین و آرابینوگالاکتان به صورت خوراکی سبب کاهش حجم تومور و وزن تومور در موش‌های توموری می‌گردید. آنالیز بافتی تومور نشان داد؛ که در گروه کنترل تراکم سلولی بسیار بالا است و همچنین نسبت هسته به سیتوپلاسم در این گروه زیاد است. درحالی‌که در گروه تیمار با ترکیب دو ماده تراکم سلولی پایین و نسبت هسته به سیتوپلاسم در این گروه کمتر از گروه‌های دیگر بود. نکته قابل توجه در ترکیب کورکومین و آرابینوگالاکتان عدم سمیت این مواد بر اندام‌های حیاتی موش بود. نتایج آنالیز ایمنوهیستوشیمی نشان داد ترکیب این دو ماده باعث کاهش بیان پروتئین تکثیری Ki67 و همچنین افزایش بیان پروتئین ضد توموری P53 می‌شود. یافته‌های تحقیق حاضر پیشنهاد می‌کند که ترکیب مواد پکتینی و پلی‌فنلی اثر مهاری بیشتری بر رشد سلول‌های سرطانی دارند.
    Abstract
    Polyphenols (such as Gallic acid and curcumin) and pectin derivatives (such as arabinogalactan) are natural products that have been broadly explored in cancer studies. They display their antitumor effects in various kinds of cancer cells. In the current research, the effect of the combination of the aforementioned compounds on breast cancer cell line was studied. Combination of these compounds significantly decreased cell growth in breast cancer cell, without any significant effect on growth of HUVEC normal cell line. According to the flow cytometry analysis, these combinations could increase cell population in SubG1 phase. Number of apoptotic cells was drastically augmented in the presence of combination of compounds. Western blotting showed that the combination of these compounds significantly decreased Bcl2 level while increased Bax and cleaved caspase3 levels in breast cancer cell. Combination of curcumin with Gallic acid or with arabinogalactan promoted apoptosis by increasing Reactive Oxygen Species (ROS) level, loss of mitochondrial membrane potential (MMP; ??m) and GSH (glutathione) depletion in breast cancer cell. For in vivo studies, BALB/c tumor-bearing mice were treated with combination of curcumin and arabinogalactan. The results pointed out that combination of curcumin and arabinogalactan reduced the tumor volume and weight in comparison with bare compound and control groups. Further H&E analysis of tumor tissue from control mice showed disorganized arrangement of breast cancer cells and a high cell density in cross section of tumor tissues. On the contrary, in tumor tissues from animals treated with combination of AG and Cur, the ratio of nucleus to cytoplasm was reduced and the nuclei were polygonal. In addition, in vivo studies showed that this combination could inhibit the progression of breast tumors through over-expression of p53 and reduction of Ki67 levels. Finally, our findings suggest that combination of these compounds could be potent agents for breast cancer therapy.Key Words: Curcumin, Gallic acid, Arabinogalactan, Breast cancer, Apoptosis, Cell cycle