عنوان پایان‌نامه
بررسی اثر سیلیبینین و anti-miR-۲۱ بر آپوپتوز و چرخه سلولی در رده های سلولی سرطان سینه T۴۷D و MCF-۷
- رشته تحصیلی
- زیست‌شناسی-علوم‌سلولی‌مولکولی
- مقطع تحصیلی
- دکتری تخصصی PhD
- محل دفاع
- کتابخانه پردیس علوم شماره ثبت: 6549;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 81418;کتابخانه پردیس علوم شماره ثبت: 6549;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 81418
- تاریخ دفاع
- ۱۳ خرداد ۱۳۹۶
- دانشجو
- زهره جهان افروز
- استاد راهنما
- نسرین معتمد
- چکیده
- سیلیبینین یک ماده گیاهی با خاصیت آنتی اکسیدانی و ضد سرطانی قوی هست که باعث توقف چرخه سلولی و القا آپوپتوز در برخی از سلول های سرطانی می شود، با این حال مکانیسم مولکولی آن دقیقا شناخته شده نیست. در مطالعه حاضر برخی از اثرات سیلیبینین بر MCF-7 ، T47Dو MCF-10A مورد بررسی و مقایسه قرار گرفت. از آنجایی که سیلیبینین به طور معنی داری بیان انکومیر MiR-21 را در هر سه رده ذکر شده کاهش داد، تاثیر anti-miR-21 در زیستایی، چرخه سلولی ، آپوپتوز، بیان ژن های هدف miR-21 مورد بررسی قرار گرفت. ترنسفکشن miR-21mimic هم در مورد نمونه های تیمار شده با سیلیبینین برای ارزیابی نقش کاهش miR-21 در تاثیرات سیلیبینین انجام شد. نتایج نشان دادند که سیلیبنین باعث توقف چرخه سلولی در MCF-7 و MCF-10A در مرحله G1 می شود در حالی که بر سلول T47D بی تاثیر هست. سیلیبنین باعث القا آپوپتوز در سلول T47D بیشتر از MCF-7 شده در حالی که بر MCF-10A بی تاثیر بود. سیلیبینین به طور معنی داری بیان PTEN را در MCF-7 افزایش داد در حالی که بر بیان آن در T47Dبی تاثیر بود. بیان Bcl2 در تمامی سلول تحت تاثیر سیلیبینین دچار کاهش شد. با این حال anti-miR-21 باعت تغییرات جزئی در زیستایی، آپوپتوز (به استثنای آپوپتوز اولیه) و چرخه سلولی در سلول ها شد. ترنسفکشن miR-21mimic در نمونه های تیمار شده با سیلیبینین باعث ایجاد تغییرات کم و بیشی در تاثیرات سیلیبینین در آپوپتوز، mRNA و پروتئین مربوط به PTEN و mRNA مربوط به Bcl2 شد. این نتایج نشان می دهد که سیلیبینین مسیر های مولکولی متفاوتی را در سلول های مختلف درگیر می کند. این مطالعه در عین حال نشان دهنده این هست که کاهش miR-21 جز مسیرهای عملگر اصلی تحت تیمار با سیلیبینین نیست و همچنین miR-21 در مراحل پیش روندگی سرطان پستان کم تاثیر بوده و احتمالا در مراحل اولیه سرطانی شدن سلول نقش مهمی داشته باشد که تایید این مطالب نیازمند مطالعات بیشتر هست.
- Abstract
- Silibinin is a natural polyphenol with high antioxidant and anticancer properties, which causes cell cycle arrest and apoptosis in most cancer cell types including breast cancer, but the in-line mechanisms, are still unknown. Here the effect of silibinin and anti-miR-21 on cell viability, apoptotic induction, cell cycle distribution, and the expression levels of downstream targets of miR-21 were investigated in MCF-7 and T47D cells. MiR-21 mimic transfection was also applied in silibinin treated samples to evaluate functional role of miR-21downregulation on silibinin effects. It was found that silibinin caused G1 cell cycle arrest in MCF-7 and MCF-10A cells but had no effect on the T47D cell cycle. Silibinin induced cytotoxic and apoptotic effects in T47D cells more than the MCF-7 cells and had no cytotoxic effect in MCF-10A cells under the same conditions. Silibinin upregulated PTEN in MCF-7 and had no effect on T47D PTEN mRNA expression. Bcl-2 expression decreased in both of the examined cancer cells under silibinin treatment. Silibinin significantly downregulated oncomiR miR-21 expression in breast cancer cells. It was found that after anti-miR-21 transfection, no significant changes were detected in cell viability, apoptosis (except early apoptosis), and cell cycle in MCF-7 and T47D cells. Compared to silibinin, miR-21 mimic transfection in combination with silibinin caused a slight modulation in some of the examined silibinin effects including apoptosis, Bcl2 mRNA and PTEN mRNA and protein levels. Together these data demonstrated negligible cancer-progression impact of miR-21 and limited roles of miR-21 downregulation in examined silibinin effects, and strengthened the anti-cancer pathways of silibinin other than miR-21downregulation in MCF-7 and T47D cells.Key words: Breast Cancer, Silibinin, Cell Cycle, Apoptosis, miR-21mimic, anti-miR-21
