عنوان پایان‌نامه
ارزیابی بیومکانیکی و هیستو پاتولوژی ترمیم ضایعه تجربی تاندون کشگکی به کمک سلولهای بنیادی مزانشیمال خودی کاشته شده بر روی داربست نانو الیاف پایه پلی کاپرولاکتون کلاژن و کندروایتین سولفات تهیه شده به روش الکتروسپینینگ در خرگوش
- رشته تحصیلی
- دامپزشکی
- مقطع تحصیلی
- دکتری عمومی
- محل دفاع
- کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 73008;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 73008
- تاریخ دفاع
- ۲۶ آذر ۱۳۹۲
- دانشجو
- عطیه خیرالهی
- استاد راهنما
- محمدمهدی دهقان
- چکیده
- دستیابی به جایگزین مناسب بافت تاندون مسئله‌ای است که مورد نظر محققان بسیاری قرار گرفته است. این جایگزین باید ضمن دارا بودن خواص مکانیکی متناسب با خواص مکانیکی بافت طبیعی تاندون، خصوصیات بیولوژیکی مناسبی (رشد، تکثیر و بیان فاکتورهای سلولی) را نیز دارا باشد. هدف از این مطالعه بررسی اثرات بیومکانیکی و هیستوپاتولوژیکی داربست تهیه شده از کندرواتین سولفات، پلی‌کاپرولاکتان و کلاژن به روش الکترواسپینینگ و سلولهای بنیادی مزانشیمی با منشاء مغز استخوان خودی، در ترمیم تاندون کشگکی خرگوش بود. در این تحقیق از 8 سر خرگوش نر سفید نیوزیلندی استفاده شد. سلولهای بنیادی از مغز استخوان بازوی هر خرگوش به طور جداگانه اخذ گردیدند. بعد از گذشتن مراحل جدا سازی و کشت، سلولهای بدست آمده بر روی داربست‌های استریل بارگذاری شدند. پس از گذشت 24 ساعت از بارگذاری، در تاندون کشگکی هر دو اندام خلفی هر خرگوش، ضایعه‌ای تمام ضخامت به ابعاد 4×10 میلی‌متر ایجاد شد. در اندام خلفی راست خرگوشها ، در محل ایجاد نقیصه، داربست همراه با سلولهای مزانشیمی گرفته شده از مغز استخوان همان خودی قرار داده شد (گروه درمان). در محل ضایعه ایجاد شده اندام خلفی مقابل، داربست بدون سلول به عنوان قرار داده شد (گروه کنترل). بعد از گذشت 8 هفته، حیوانات به روش انسانی معدوم شده و نمونه بافتی از محل نقیضه تاندونی اخذ شدند. نمونه های برداشته شده از 4 حیوان برای انجام بررسی‌های بیومکانیکی و نمونه‌های 4 حیوان دیگر برای بررسی هیستولوژی استفاده شد. نتایج ارزیابی بیومکانیک نشان داد که بین دو گروه درمانی و کنترل، از نظر ضریبyoung (025/0p: ) و معیار درصد کشیدگی (038/0p:)، تفاوت معنا داری به نفع گروه درمانی وجود دارد (p<0/05) اما از نظر مقاومت کششی (435/0 :p)، این اختلاف معنی دار نیست (p>0/05). نتایج ارزیابی هیستوپاتولوژیکی نشان داد بین دو گروه درمانی و کنترل از نظر حضور سلولهای آماسی در بافت همبند ترمیمی (032/0p:)، عروق زایی (049/0p:)، همسانی و یکنواخت بودن دسته‌جات رشته‌های کلاژن (016/0p:)، تفاوت معنا داری به نفع گروه درمانی وجود دارد (p<0/05). بر اساس نتایج این مطالعه می‌توان عنوان نمود که داربست پلی کاپرولاکتان، کلاژن و کندروئتین سولفات تهیه شده به روش الکترواسپینینگ همراه با سلولهای مزانشیمی مشتق از بافت مغز استخوان، موجب التیام در جراحت‌های تاندونی می‌شود. کلیدواژه¬ها: تاندون، ترمیم تاندون، سلولهای بنیادی، داربست پلی کاپرولاکتان-کلاژن-کندروئتین سولفات، الکترواسپینینگ
- Abstract
- Fiber-based scaffolds have been widely used for tendon and ligament tissue engineering. Knitted scaffolds have been proved to favor collagenous matrix deposition which is crucial tendon/ligament reconstruction. The aim of this study was to assess the effect of implantation of PolyCaprolactone-chondroitin sulfate-collagen scaffold seeded with rabbit bone marrow-derived mesenchymal stem cells (BMDSCs), on patellar tendon defect in rabbit. In this study, eight mature New Zealand White rabbit were used. A 4mm * 10mm long gap defect was created in the rabbit’'s patellar tendons of both hind limbs. In one of the hind limbs (thereatment group), a seeded scaffold with the rabbit's bone marrow-derived mesenchymal stem cells were implanted and in the other hind limb (control group), a scaffold without stemcells was implanted. After eight weeks of implantation, the animals ethically and on standard protocols were scarificed and tendon samples obtained in order to biomechanical and histological evaluations. The biomechanical evaluation indicated that the difference between young’s modulus and the ultimate tensile strength of the control and the treatment groups was significantly favour of the treatment group. Acroding to the histopathogical study of the presence of inflammatory cells in the connective tissue, angiogenesis, and the total average of reorganization, arrangement and collagen alighnmentin both control and the treatment group, the letter showed significantly different (improved) results. With regard to the results of this study, it was concluded that application of PolyCaprolactone-chondroitin sulfate-collagen scaffoldIt appears that this polymeric scaffold and with mesenchymal cells has a strong effecthelps to improve speed and quality of healing in tendon injuriesjury healings.
