عنوان پایان‌نامه
بررسی مکانیسم آنژیو ژنز
- رشته تحصیلی
- دامپزشکی
- مقطع تحصیلی
- دکتری عمومی
- محل دفاع
- کتابخانه دانشکده دامپزشکی شماره ثبت: 3473;کتابخانه دانشکده دامپزشکی - مخزن مرد آباد شماره ثبت: 3473;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 62253
- تاریخ دفاع
- ۳۱ شهریور ۱۳۹۲
- دانشجو
- الهام محمدی
- استاد راهنما
- سیدمهدی نصیری
- چکیده
- القاء آنژیوژنز که امروزه به عنوان یک روش درمانی بیماری های ایسکمیک مطرح می باشد نیازمند درک جامعی از فعالیت سلول های اندوتلیال و مطالعه ی عمیق تر فاکتور های بیولوژیک و سلول هایی با توان بالقوه بر روی سلول های اندوتلیال می باشد. سلول های بنیادی به عنوان منبع بالقوه که اثرات پرو آنژیوژنیک و همچنین ضد آنژیوژنیک آن ها در طیف وسیعی از حالت های پاتوفیزیولوژیک به اثبات رسیده است، توجهات را از بعد تحقیقاتی به خود جلب کرده اند و تعامل میان این سلول ها و سلول های اندوتلیال موضوع تحقیقات بسیاری در سال های اخیر بوده است. هدف از این مطالعه پرداختن به اثرات بالقوه ی سه نوع سلول بنیادی بالغین که از بافت های مختلف جدا شده اند بر روی فعالیت فاکتور های مهم رگ زایی در سلول های اندوتلیال در سیستم هم کشتی و در طی دوره ی زمانی مشخص می باشد. روش ها: برای این منظور سلول های اندوتلیال بند ناف انسان با سلول های بنیادی و یا با conditioned media برگرفته از این سلول ها در سیستم هم کشتی و بر روی ماتری ژل با یکدیگر مجاور شدند. سپس ارزیابی میزان رگ زایی با اندازه گیری طول تیوب ها و امتیاز دهی کلونی ها انجام شد. همچنین به دنبال هم کشتی سلول های اندوتلیال/ استم سل، سلول های اندوتلیال CD31 مثبت با استفاده از تکنیک sorting cell جدا شده و آنالیز وسترن بلاتینگ جهت بررسی تغییرات بیان فاکتور های دخیل در رگ زایی انجام شد. نتایج: سلول های بنیادی مزانشیمی جدا شده از بافت های مغز استخوان و چربی به طور معنی داری سبب افزایش آنژیوژنز از هر دو طریق پاراکرینی (انکوبه کردن سلول های اندوتلیال با conditioned media سلول های بنیادی) و جاکستاکرینیco-culture) ) شدند. این دو نوع سلول بنیادی همچنین باعث افزایش یا کاهش معنی داری در بیان فاکتورهای رگ زا در سلول های اندوتلیال نسبت به گروه کنترل و همچنین سلول های ماهواره ای (satellite cells) شدند. نتیجه گیری: القای سیگنال های پرو-آنژیوژنیک در سلول های اندوتلیال به واسطه ی سلول های بنیادی مزانشیمی جدا شده از مغز استخوان و چربی نشان دهنده ی اثرات مهم و معنی دار سلول های بنیادی در تحریک روند رگ زایی می باشد که می تواند به عنوان یک روش درمانی مفید در شرایط آسیب های ایسکمیک مطرح باشد.
- Abstract
- Background aims: Efficacy of therapeutic angiogenesis needs to have a comprehensive understanding of endothelial cell (EC) function and complexity of biological factors and cells with potential effects on EC. Stem cells are considered as key components of pro- and anti-angiogenic milieu in a wide variety of physiopathological states, and interactions of EC-stem cells have been the subject of controversy in recent years. In this study, potential effect of three tissue-specific adult stem cells, namely rat marrow-derived mesenchymal stem cells (rBMSCs), rat adipose-derived mesenchymal stem cells (rADSCs) and rat muscle-derived satellite cells (rSCs) on endothelial activation of key angiogenic signaling molecules,including VEGF, Ang-2, VEGFR-2, Tie-2 and Tie2-pho was investigated. Methods: Human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) were cocultured with the stem cells or incubated with the stem cells-derived conditioned media on Matrigel. Following EC-stem cell coculture, CD31-positive ECs were flow sorted and submitted to western blotting to analyze potential changes in the expression of the pro-angiogenic signaling molecules. Results: Elongation and co-alignment of the stem cells were seen along EC tubes in the EC-stem cell cocultures on Matrigel, with cell-to-cell dye communication in the EC-rBMSC cocultures. rBMSCs and rADSCs significantly improved endothelial angiogenesis in both juxtacrine and paracrine manners. These two latter stem cells dynamically up-regulated VEGF, Ang-2, VREGR-2 and Tie-2, whereas down-regulated Tie2-pho and the Tie2-pho/Tie-2 ratio in ECs. Conclusions: Induction of a pro-angiogenic signaling in ECs by marrow- and adipose-derived MSCs further indicate the significance of stem cell milieu in angiogenesis dynamics.
