عنوان پایان‌نامه
بررسی نقش الکتروفیزیولوژیک اتصالات شکافدار حاوی کانکسین
- رشته تحصیلی
- دامپزشکی
- مقطع تحصیلی
- دکتری عمومی
- محل دفاع
- کتابخانه دانشکده دامپزشکی شماره ثبت: 3455;کتابخانه دانشکده دامپزشکی - مخزن مرد آباد شماره ثبت: 3455;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 57687
- تاریخ دفاع
- ۰۶ خرداد ۱۳۹۲
- دانشجو
- فاطمه اعتمادی
- چکیده
- هدف: اتصالات شکافدار یکی از مولکولهای هدف دارویی جهت درمان صرع میباشند. شبکهای از نورونهای بینابینی مهاری گاباارژیک در ناحیهی CA1 هیپوکمپ وجود دارند، که توسط اتصالات شکافدار تشکیل شده از کانکسین 36 با هم در ارتباط هستند. در این مطالعه، نقش این کانکسینها بر شدت حملات تشنجی و روند اکتساب صرع در مدل کیندلینگ سریع الکتریکی ناحیهی CA1 هیپوکمپ بررسی گردید. روشها: با کمک دستگاه استریوتاکس الکترودهای ثبات و تحریکی و کانول تزریق در ناحیهی CA1 هیپوکمپ موشهای سفید بزرگ آزمایشگاهی نر نژاد ویستار در وزن حدود 280 تا 350 گرم کار گذاشته شد. حیوانات با تحریک الکتریکی به روش کیندلینگ سریع الکتریکی صرعی شدند. دوزهای 100 و 500 و 1000 میکرومولار از داروی کینین به درون ناحیهی CA1 تزریق شد و 10 دقیقه بعد از تزریق پارامترهای تشنجی (طول مدت تخلیههای الکتریکی متعاقب اولیه و طول مدت تخلیههای الکتریکی متعاقب ثانویه و طول مدت مرحلهی پنجم تشنجی و طول مدت مراحل تشنجی پنجگانه و مراحل رفتاری صرعی) حاصل از تحریک حیوانات کاملا کیندل شده ثبت شد. در سری دوم آزمایشها، کینین به طور مزمن با دوزهای 30 و 100 میکرومولار در سه گروه متفاوت روزی یک بار به طور مزمن به درون ناحیهی CA1 تزریق شد و اثر آن بر سرعت کیندلینگ سریع الکتریکی CA1 ارزیابی شد. یافتهها: تزریق حاد کینین در دوزهای 500 و 1000 میکرومولار درون CA1 موجب افزایش معنی دار 140% و 560% پارامترهای تشنجی درحیوانات کاملا کیندل شده گردید. همچنین تزریق مزمن کینین با دوز 100 میکرومولار توانست سرعت کیندلینگ ناحیهی CA1 هیپوکمپ را زیاد کند، به طوریکه تعداد تحریکات لازم برای رسیدن به مرحلهی پنجم تشنجی در حیوانات دریافت کنندهی دوز 100 میکرومولار کینین به طور معنی داری نسبت به گروه کنترل از 36 تریال به 21تریال (15 تریال) کاهش یافته و طول مدت تخلیههای متعاقب اولیه افزایش یافته و طول مدت تخلیههای متعاقب به طور معنی داری افزایش یافت. نتیجه گیری: برخلاف نتایج گذشته، که کینین در بعضی مناطق مغز مانند آمیگدال به عنوان یک مادهی مهارکنند? صرع شناخته شده بود، در این تحقیق، کینین در ناحیه یCA1 هیپوکمپ صرع را تسریع نمود. این اثر کینین به دلیل ممانعت از اثر مهاری نورونهای بینابینی گاباارژیک بر روی سلولهای پیرامیدال ناحیهی CA1 هیپوکمپ ایجاد شده است.
- Abstract
- Aim : Gap junctions (GJs) are one of the potential molecular targets in the treatment of epilepsy. There is a network of GABAergic inhibitory interneurons in the CA1 area of hippocampus that communicate each other by GJs containing connexin 36. In this study, the role of connexin 36 existing in CA1 area,in manifestation of kindled seizures as well as kindling rate was evalutated. Methods: Male Wistar rats (280 – 350 g) were stereotaxically implanted by electrode and injection cannula in the CA1 area. The animals became epileptic by daily electerical stimulation. Quinine ( a specific blocker of connexin36) at doses of 100, 500, 1000 µM were injected directly intra - CA1 and kindled seizure parameters including primary after discharge duration, secondary after discharge duration, stage 5 duration, seizure duration, behavioral seizure stages were recorded 10 min and 24 hours afterward. Moreover, quinine (30 & 100 µM) were injected intra - CA1 once daily during kindling development for 3 days and the effect of quinine on the rate of kindling was evaluated. Results : Quinine at the doses of 100, 500, 1000 µM increased 140% & 560% kindled seizure parameters. Furthermore, chronic intra - CA1 infusion of quinine at the dose of 100 µM significiantly increased kindling rate and decrease the numbers of stimulation needed (from 36 trials to 21). Conclusions : Quinine increased kindled seizure parameters in CA1 area of Hippocampus. This is because quinine prevents inhibitory effect of GABA ergic interneurons on pyramidal cells in Hippocampus.
