عنوان پایان‌نامه
جداسازی و تخلیص برخی ازپپتیدهای ضد میکروبی پوست قورباغه مردابی ایران ( Rana ridubunda) و ارزیابی اثرات ضد قارچی و تعدیل کنندگی ایمنی آنها
- رشته تحصیلی
- قارچ شناسی
- مقطع تحصیلی
- دکتری تخصصی PhD
- محل دفاع
- کتابخانه دانشکده دامپزشکی شماره ثبت: 559 ت;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 63130;کتابخانه دانشکده دامپزشکی - مخزن مرد آباد شماره ثبت: 559 ت
- تاریخ دفاع
- ۱۷ آذر ۱۳۹۲
- دانشجو
- احمد عرفان منش
- استاد راهنما
- علیرضا خسروی
- چکیده
- پپتیدهای ضد میکروبی به طور معمول نسبتاً کوتاه (12 تا 100 آمینو اسید) با بار مثبت (بار خالص (9+)-(2+) ) و آمفی فیلیک هستند. این پپتیدها از بسیاری از موجودات زنده جدا شده اند. چنین پپتیدهایی اخیراً به عنوان جزئی از پاسخ ایمنی ذاتی با خاصیت ضد میکروبی وسیع شناسایی شده اند. امروزه بیش از500 نوع پپتید ضد میکروبی با منشا غدد پوست دوزیستان گزارش شده است. مطالعه حاضر به بررسی اثر پپتیدهای جداشده از پوست قورباغه مردابی ایران بر رشد گونه های حساس و مقاوم به فلوکونازول کاندیداآلبیکنس و کاندیدا گلابراتا و نیز اثر بر برخی فاکتورهای سیستم ایمنی پرداخته است. در این مطالعه پپتیدهای پوست قورباغه با روش الکل اسید استخراج شدند، پس از خالص سازی با ستونSep-Pack و سفادکس تنها یک فراکشن پپتیدی به دست آمد. اثر غلظت های مختلف (µg/ml 100-2/0) این پپتید بر ممانعت از رشد برخی مخمرهای جنس کاندیدا، قدرت کشندگی و تولید نیتریک اکساید توسط سلول های مونوسیتی ماکروفاژی و تولید سایتوکاین های IL1?، IL12 و IL13 از لنفوسیتهای موشی در شرایط آزمایشگاهی مورد ارزیابی قرار گرفت. مقایسه آماری نتایج نشان داد که بیشترین تاثیر ممانعت از رشد مخمرها توسط پپتید در غلظت های µg/ml 25، 50 و 100 بود. غلظت های مختلف این پپتید بر روی قدرت حیات سلول-های ماکروفاژی صفاق موش تاثیر منفی نداشتند. بررسی اثر غلظت های مختلف این پپتید بر فاکتورهای مختلف سیستم ایمنی نشان داد که پپتید بر روی قدرت کشندگی ماکروفاژها و ترشح نیتریک اکساید توسط این سلول ها اثری ندارد(05/0p>)؛ در عین حال این پپتید اثر تحریکی LPS بر ماکروفاژها را نیز مهار کرده بود. پپتید مورد مطالعه ترشح IL12 و IL13 توسط لنفوسیت های غدد لنفاوی موش را بطور معنی داری افزایش داده بود (05/0(p<؛ لیکن بر ترشح IL1? تاثیر معنی داری نداشت(05/0p>).
- Abstract
- Antimicrobial peptides, with relative short length (2-100 amino acids) and positive charge (pure charge (+9)-(+2)) are amphiphilic compounds. These peptides have been isolated from animal, and plants. Recently, they have been known as a part of innate immune responses as well as their antimicrobial properties. Up to now, more than 500 antimicrobial peptides from amphibian skins have been reported. The aim of this study was to evaluate the anti-Candida and immunomodulatory effects of cationic peptides derived from Rana ridibunda skin. In this study, using alcohol-acid technique, peptides of frog’s skin were isolated and purified by Sep-Pack and Sephadex column. Then the anti-Candida activity (Fluconazole-Resistance C. albicans, Fluconazole-Sensitive C. albicans, and C. glabrata), killing and nitric oxide production by macrophages and the ability to induce cytokines' secretion including IL1?, IL12 & IL13 by murine lymphocytes in different concentrations of the peptides were evaluated. Based on statistical analysis, peptides in concentration ranging from 25 to 100µg/ml had the most anti-Candida activities. With respect to different understudy Candida species, these agents had the less effect on the Fluconazole Resistance C. albicans (P<0.05). The peptides had no effect on viability of peritoneal macrophages. The effects of this peptide on some activities of immune system pointed that there is no significant change on killing and NO production by macrophages (P>0.05). However, these peptides inhibited the stimulatory effect of LPS on macrophages. IL12 and IL13 secretion significantly increased by lymphocytes while IL1? was not affected in comparison with the control group.
