عنوان پایان‌نامه
ارزیابی روشهای الگوتیناسیون سریع و ممانعت از آن
- رشته تحصیلی
- دامپزشکی
- مقطع تحصیلی
- دکتری عمومی
- محل دفاع
- کتابخانه دانشکده دامپزشکی شماره ثبت: 3417;کتابخانه دانشکده دامپزشکی - مخزن مرد آباد شماره ثبت: 3417;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 56087
- تاریخ دفاع
- ۲۸ دی ۱۳۹۱
- دانشجو
- سیما نیکخواه
- استاد راهنما
- شهرام جمشیدی, امید مددگار
- چکیده
- روشهای تشخیص سریع به منظور شناسایی به موقع پارویروس سگسانان از اهمیت و کاربرد زیادی برخوردار میباشند. یکی از روشهای سریع تشخیص آنتیژن ویروس، روش SAT بوده که قبل از این بااستفاده از اریتروسیتهای رزوس و خوک انجام گرفته است. تاکنون مطالعه دقیقی در زمینه انجام این آزمون با استفاده از خون گربه صورت نگرفته است. در این مطالعه به ارزیابی روشهای آگلوتیناسیون سریع و ممانعت از آن با استفاده از اریتروسیتهای خون گربه در تشخیص سروتیپهای پاروویروس در سگهای مبتلا پرداخته شد. به منظور انجام این تحقیق، از سیوسه قلاده سگ به طور تصادفی از نژادهای مختلف و در محدوده سنی زیر یکسال که دارای علائم مشکوک به بیماری پاروویروس بودند و نتایج کیت ایمونوکروماتوگرافی در آنها مثبت بود،نمونه مدفوعی جمعآوری گردید. همچنین ازسگهای مشکوک، نمونه خون به منظور اخذ سرم جهت انجام آزمایش SIT جمعآوری شد. خون گربه و میمون رزوس سالم نیز، در ظروف حاوی ماده ضد انعقاد آلسور در روز انجام آزمایش جمعآوری گردید. آزمایشهای SAT و SIT در دماهای مختلف 37، 25 و 4 درجه سانتیگراد و در PH خنثی با استفاده از RBC های شسته شده رزوس و گربه انجام گردید. در این تحقیق از روش کشت سلولی به عنوان استاندارد طلایی استفاده شد و جهت تعیین سروتیپهای ویروس از روش مولکولی PCR استفاده گردید. دراین تحقیق 13 نمونه از 33 نمونه مورد مثبت در آزمون ایمنوکروماتوگرافی در آزمایش SAT با استفاده از خون گربه و میمون رزوس نتایج مثبت نشان دادند. تمامی موارد مثبت در مدت زمان کمتر از یک دقیقه آگلوتینه شده و تفاوتی در شدت و مدت زمان اگلوتیناسون میان خون گربه و رزوس وجود نداشت. نمونه سرم این 13 مورد در روش SIT از آگلوتیناسیون ممانعت به عمل آوردند. حساسیت و ویژگی روش SAT در مقایسه با کشت سلولی به ترتیب 31/92 و 95 درصد گزارش گردید. مجموع نتایج این مطالعه میتواند روش هماگلوتیناسیون با خون گربه را به عنوان روش غیرتهاجمی، ارزان، راحت، سریع، و با دقت مناسب جهت تشخیص عفونتهای پاروویروس سگها و به عنوان یک روش تکمیلی در کنار روشهای غربالگری از قبیل ایمونودیفوزیون به منظور مصارف بالینی توصیه نماید.
- Abstract
- Rapid diagnosis methods for early detection of canine parvovirus have many importance and application. One of the methods of viral antigen rapid detection is SAT which was performed prior using by Rhesus and pig erythrocytes. Since precise study has not been performed using of cat erythrocytes for fulfilling of this test. In this study, the evaluation of rapid agglutination methods and inhibition of it by using of cat erythrocytes in diagnosis of canine parvovirus serotypes was made. For this study, fecal samples were collected randomly from thirty-three dogs from different races under one year in age with suspected symptoms of the parvovirus disease and positive result in immunochromatography kit. Also, blood sample was collected from suspected dogs to obtain serum for SIT test. Blood of healthy Rhesus and cat were collected in alsever's anticoagulant containers on the testing day. SAT and SIT tests at different temperatures 37, 25 and 4 ° C and neutral PH were performed using by washed RBC of cat and Rhesus. In this study, the cell culture method was used as the gold standard and molecular PCR method was used to determine the serotypes of the virus. In this study, 13 samples of 33 samples that were positive in immunochromatography test, showed positive results in the SAT test using blood from cats and Rhesus. All positive cases showed agglutination in less than a minute and there are no differences in the severity and duration of the blood agglutination between cat and Rhesus bloods. Serum samples of these 13 patients inhibited from agglutination in SIT method. Sensitivity and specificity of SAT method in comparison with culture were reported 92/31% and 95% respectively. Overall, these results could recommend hemagglutination using by cat blood as noninvasive, inexpensive, convenient, fast, and accurate method for diagnosis of parvovirus infection in dogs and as a complementary screening methods such as immunodiffusion for clinical application.
