عنوان پایان‌نامه
شناسائی
- رشته تحصیلی
- دامپزشکی
- مقطع تحصیلی
- دکتری عمومی
- محل دفاع
- کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 56102;کتابخانه دانشکده دامپزشکی شماره ثبت: 3403;کتابخانه دانشکده دامپزشکی - مخزن مرد آباد شماره ثبت: 3403
- تاریخ دفاع
- ۲۹ شهریور ۱۳۹۱
- دانشجو
- عارفه قدوسی
- استاد راهنما
- تقی زهرائی صالحی, بهار نیری فسایی
- چکیده
- هدف از این مطالعه تمایز مولکولی سالمونلاهای جدا شده از طیور و تعیین ژن های مقاومت آنتی بیوتیکی آنها به روش PCR می باشد. در این مطالعه 46 جدایه سالمونلا که از طیور بومی استان مازندران و عمدتا شهرستان بابل جدا گردیده بود، مورد مطالعه قرار گرفت. ابتدا آزمایش سروتایپینگ جدایه ها با استفاده از آنتی سرم های O و H صورت گرفت. سپس سرووار سالمونلاهای سروتایپ شده با روش PCR تایید شد. روش استاندارد دیسک دیفوزیون برای تعیین حساسیت جدایه ها نسبت به 13 عامل ضد میکروبی انجام گردید. آنتی بیوگرام جدایه ها با استفاده از آنتی بیوتیکهای آمپی سیلین، سفازولین، سفیکسیم، سفوتاکسایم، سفتریاکسون، تتراسیکلین، داکسی سایکلین، تری متوپریم سولفامتوکسازول، جنتامایسین، کلرامفنیکل، فلورفنیکل، انروفلوکساسین و دیفلوکساسین صورت گرفت. از مجموع 46 نمونه جمع آوری شده، با استفاده از روش سروتایپینگ 44 نمونه به عنوان سالمونلا تایید شدند. تمامی 44 جدایه سالمونلا در این روش، به گروه سرمی C1 و سرووار اینفنتیس تعلق داشتند. سرووار این جدایه ها، با روش PCR، به عنوان سرووار اینفنتیس تایید شدند. در این آزمون تمامی نمونه ها به آنتی بیوتیک های تتراسایکلین و داکسی سایکلین و بیش از 70 درصد نمونه ها به آنتی بیوتیک های کلرامفنیکل و فلورفنیکل مقاومت نشان دادند. آزمون PCR جهت تعیین ژن های مقاومت، انجام گردید. در این مطالعه از ژن های floR، catI جهت تعیین ژن های مقاومت به فلورفنیکل و کلرامفنیکل و از ژن tetA جهت تعیین ژن مقاومت به تتراسایکلین استفاده شد. تمامی نمونه های مقاوم به فلورفنیکل و کلرامفنیکل، دارای ژن های floR و catI بودند.هیچ یک ازجدایه های دارای مقاومت به آنتی بیوتیک های تتراسایکلین و داکسی سایکلین واجد ژن های tetA و tetG نبودند. جهت تایید بیان ژن در سویه هایی که به صورت ژنوتیپی ژن های مقاومت را نشان دادند، به طور همزمان PCR از پرگنه و کشت در محیط آنتی بیوتیک دار با غلظت های استاندارد انجام گردید. تمامی جدایه های واجد ژن های cat و floR ، قادر به رشد در محیط های کشت با غلظت های استاندارد بودند.
- Abstract
- The aim of this study was molecular identification of Salmonella serovars from poultry and their antibiotic resistance genes by PCR. 46 salmonella samples which were isolated from backyard poultry of Mazandaran province, were collected. First the samples were serotyped by O and H antisera. Then the serotypes were identified by PCR. Antimicrobial susceptibility of the isolates against 13 antimicrobial agents was determined using standard disk diffusion method. The antibiotics used for antibiotic susceptibility test were ampicillin, cefazolin, cefotaxime, cefixime, ceftriaxon, tetracycline, doxycycline, trimethoprim sulfamethoxazole, gentamicin, chloramphenicol, florfenicol, enrofloxacin, difloxacin. According to serotyping, Of the 46 samples, 44 were identified as Salmonella. All of the 44 isolates belonged to serogroup C1 and serovar infantis. All of the strains were resistant to tetracycline and doxycycline. More than 70 percent of isolates were resistant to chloramphenicol and florfenicol. PCR reaction was performed for identification of resistance genes. The genes floR and catI were used for detection of resistance to florfenicol and chloramphenicol. The genes tetA and tetG were used for detection of resistance to tetracycline. For identification of phenotypic resistance in strains which showed resistance genes by PCR, colony PCR and culture on plates containing each antibiotic was performed simultaneously. All of the florfenicol resistant Salmonella carried floR. All of the isolates which showed resistance to chloramphenicol carried catI. None of the tetracycline resistant Salmonella carried tetA and tetG. The result of colony PCR and culture in antibiotic medium confirmed the results of PCR and showed phenotypic resistance in these samples.
