عنوان پایان‌نامه

مطالعه مورفومتریک و ژنوتایپینگ ژیروداکتیلوس در برخی از گونه های ماهیان زینتی



    دانشجو در تاریخ ۱۰ تیر ۱۳۹۱ ، به راهنمایی ، پایان نامه با عنوان "مطالعه مورفومتریک و ژنوتایپینگ ژیروداکتیلوس در برخی از گونه های ماهیان زینتی" را دفاع نموده است.


    رشته تحصیلی
    بهداشت آبزیان
    مقطع تحصیلی
    دکتری تخصصی PhD
    محل دفاع
    کتابخانه دانشکده دامپزشکی شماره ثبت: 494 ت;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 53307;کتابخانه دانشکده دامپزشکی - مخزن مرد آباد شماره ثبت: 494 ت
    تاریخ دفاع
    ۱۰ تیر ۱۳۹۱
    دانشجو
    شیلا امیدظهیر
    استاد راهنما
    مهدی سلطانی, حسینعلی ابراهیم زاده موسوی
    چکیده
    لینک فایل چکیده
    ژیروداکتیلوس انگلی کوچک از شاخه کرم های پهن مونوژن (تک میزبانه) و جز انگل های خارجی مهم ماهی های پرورشی، آزاد و زینتی آب شیرین و آب شور و ماهی های محسوب می شود. با توجه به اینکه انگل ژیروداکتیلوس یکی از انگل های شایع در ماهیان زینتی می باشد که می تواند سبب بیماری و خسارات اقتصادی قابل توجهی گردد، در این مطالعه سعی شده است با تلفیق روش های تشخیص ریخت شناسی و مولکولی، گونه های انگل ژیروداکتیلوس جداسازی شده از ماهیان زینتی مورد شناسایی قرار گیرد. در این مطالعه از 320 قطعه ماهی زینتی جهت بررسی آلودگی به انگل ژیروداکتیلوس نمونه گیری شد. پس از بررسی با میکروسکوپ نوری، انگل ژیروداکتیلوس از پوست و باله های انواع مختلف ماهی طلایی و ماهی اسکار جداسازی گردید. ویژگیهای مورفولوژیک (ریخت شناسی) هر یک از انگل ها بر اساس کلیدهای تشخیصی با استفاده از عکسبرداری، ترسیم و اندازه گیری قسمت های مختلف اپیستهاپتور انگل (قلاب مرکزی، قلابک حاشیه ای، میله پشتی، میله شکمی) تعیین گردید. جهت بررسی و شناسایی مولکولی گونه های انگل ژیروداکتیلوس، دو پرایمر جامع برای تکثیر DNA گونه های انگل ژیروداکتیلوس طراحی گردید. پرایمرSense ، در ناحیه 5.8S ژن RNA ریبوزومی (5'CGATCATCGGTCTCTCGAAC3') و پرایمر Anti-sense، در ناحیهITS2 ژن RNA ریبوزومی (5'CTCTAGTGGTCCTTCTTCCTTAA3') طراحی گردید. با استفاده از روش PCR قسمتی از توالی 5.8S ژن ریبوزوم RNAو قسمتی ازتوالی ITS2 ژن RNA ریبوزومی به دست آمد. پس از خالص سازی محصول PCR و تعیین توالی نوکلئوتیدی، توالی به دست آمده با توالی های ثبت شده انگل ژیروداکتیلوس در ژن بانک مورد مقایسه قرار گرفت. در مطالعه حاضر، 4 گونه انگل ژیروداکتیلوس شامل ژیروداکتیلوس گرلیی، ژیروداکتیلوس کوبایاشی و ژیروداکتیلوس لونگوآکومیناتوس در ماهی طلایی و ژیروداکتیلوس سیچلیداروم در ماهی اسکار به روش های ریخت شناسی و مولکولی شناسایی شدند. در این مطالعه برای اولین بار انگل ژیروداکتیلوس در ماهیان زینتی در ایران با استفاده از روش های ریخت شناسی و مولکولی مورد بررسی قرار گرفت. می توان نتیجه گرفت استفاده از بررسی ریخت شناسی به همراه استفاده از روش مولکولی، بهترین دستاورد را برای شناسایی دقیق گونه های انگل ژیروداکتیلوس و معرفی گونه های جدید این انگل به همراه دارد.
    Abstract
    Gyrodactylus is a small monogenean ectoparasite from phylum platyhelminthes that lives on the skin and fins of the most world’s fish species. Gyrodactylus appears as one of the most prevalent parasites of ornamental fish. Considering the economic importance of ornamental fish, identification of the parasite in which cause disease and loss to ornamental fish industry is necessary. The present study aimed to identify the morphological and molecular characteristics of Gyrodactylus parasite. In order to isolate and identify of Gyrodactylus, a total of 320 ornamental fish were sampled. After examination, Gyrodactylus parasites were identified in different varieties of Carassius auratus (gold fish) and Astronotus ocellatus (oscar). Gyrodactylus parasites were collected from skin and fins of fish. The morphological identification of Gyrodactylus specimens were performed using the measurements and drawings of opisthaptoral hard parts (anchor, marginal hook, dorsal bar and ventral bar) of the Gyrodactylus parasites. The molecular species description was carried out by Polymerase chain reaction (PCR) using sense primer (5?-CGATCATCG GTC TCT CGA AC- 3?) at 5.8S rDNA and the antisense primer (5?-TTA AGG AAG AAC CAC TAG AG-3?) at ITS2 rDNA. After purification of PCR product and sequencing, the specimen sequences were compared with other Gyrodactylus sequences available in GenBank. Based on morphometric analysis and sequencing, the Gyrodactylus specimens were described as Gyrodactylus gurleyi, Gyrodactylus kobayashii and Gyrodactylus longoacuminatus in Carassius auratus and Gyrodactylus cichlidarum in Astronotus ocellatus. This is the first report regard to Gyrodactylus species on Astronotus ocellatus. This is the first study of Gyrodactylus parasite on ornamental fish in Iran using both morphometric and molecular characterization. It is concluded that combinations of morphological analysis with molecular techniques are responsible methods to identification of Gyrodactylus species. With respect to obtained result, this study should be continued into the future.