عنوان پایان‌نامه
ارزیابی آغوز هایپر ایمن گاو آبستنایمن شده با پروتئین نو ترکیب P۲۳ کریپتوسپوریدیوم پاروم در پیشگیری از ابتلای گوساله به کریپتوسپوریدیوزیس
- رشته تحصیلی
- انگل شناسی دامپزشکی
- مقطع تحصیلی
- دکتری تخصصی PhD
- محل دفاع
- کتابخانه دانشکده دامپزشکی شماره ثبت: 653 ت;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 76199;کتابخانه دانشکده دامپزشکی - مخزن مرد آباد شماره ثبت: 653 ت;کتابخانه دانشکده دامپزشکی شماره ثبت: 653 ت;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 76199;کتابخانه
- تاریخ دفاع
- ۲۵ اردیبهشت ۱۳۹۵
- دانشجو
- ندا عسکری
- استاد راهنما
- محمدرضا مخبردزفولی, پرویز شایان
- چکیده
- کریپتوسپوریدیوم پاروم تک یاخته ای از شاخه اپی کمپلکسا است که سلول های اپیتلیوم روده ای اکثر مهره داران را درگیر کرده و به علت نبود ترکیبات دارویی موثر به عنوان یکی از معضلات مهم سلامت عمومی در جوامع انسانی و دامی مطرح است. به همین دلیل به نظر می رسد که ایمن سازی غیرفعال، به عنوان یک راهکار اساسی در درمان و پیشگیری از بیماری حائز اهمیت باشد. در این مطالعه از ژن کدکننده پروتئین P23 که قبلا در پلاسمید pQE-32 کلون و در دمای C° 70- نگهداری شده بود، استفاده شد. در ادامه، پلاسمید نوترکیب وارد باکتری E. coliDH5? پذیرا شده گردید و پس ازالقا، پروتئین نوترکیب تولید شده با استفاده از ستون های Ni-NTA Spin Kit تخلیص شد. 300 میکروگرم از پروتئین مورد نظر پس از آماده سازی در چهار نوبت با فواصل دو هفته ای به گاوهای آبستن 70 روز مانده به زایش در دو گروه شاهد و آزمایش تزریق شد. خونگیری از گاوها قبل از ترزیق اول و دو هفته پس از هر تزریق انجام شد. گوساله ها در روز اول آغوز دوشش اول و در روز دوم آغوز دوشش دوم دریافت کردند و 12 ساعت پس از تولد با 107×1 اووسیست کریپتوسپوریدیوم پاروم به صورت خوراکی آلوده شدند. خونگیری از گوساله¬ها بلافاصله پس از تولد و 48 ساعت پس از آن صورت گرفت. نتایج حاکی از آن بود که تیترآنتی بادی های سرم و آغوز دوشش اول گاوهای ایمن شده در مقایسه با گروه کنترل به صورت معناداری افزایش یافته و گوساله های تغذیه شده با آغوز هایپرایمن هیچ کدام از علائم کریپتوسپوریدیوزیس را نشان ندادند. همچنین، در این گوساله ها میزان دفع اووسیست کاهش و شروع آن نیز به تاخیر افتاد. بنابر نتایج حاصل، پروتئین P23 می تواند به عنوان گزینه مناسبی در جهت ایمن سازی غیرفعال گوساله های تازه متولد شده بر علیه کریپتوسپوریدیوزیس به کار رود.
- Abstract
- Cryptosporidium parvum is an apicomplexan protozoan parasite which affects the epithelial cells of the most vertebrates and due to the lack of the effective pharmaceutical compounds is known as one of the major public health problems in human and animal populations. For this reason, it seems that passive immunization is important as a fundamental solution for the treatment and prevention of disease. In this study, P23 protein gene which previously was cloned at pQE-32 and kept at 70C° was used. In continue the recombinant plasmid was transferred to the competent E. coliDH5? and after induction, produced recombinant P23 was purified with Ni-NTA Spin Kit. 300 µg prepared protein was injected in to the pregnant cows (test and control groups) 4 times from 70 days to parturition every 2 weeks. Blood collection was done before the first injection and 2 weeks after each. Calves received first milking colostrum in first day and second milking colostrum in the second day after birth and were inoculated rally with 1×107 Cryptosporidium parvum oocysts at 12h postpartum. Blood sample immediately and 48h after birth was collected from the calves. Results showed that in contrast to the control group, the antibody titer in the sera and first milking colostra of the immunized cows significantly increased and calves fed hyperimmune colostrum did not show cryptosporidiosis signs. Moreover, enriched colostrum not only reduced significantly the amount of oocyst excretion but also delayed its onset. Our study showed that recombinant P23 protein could be used for passive immunization of newborn calves against Cryptosporidiosis.
