عنوان پایان‌نامه
ارزیابی میزان نفوذپذیری عروق ریه متعاقب استفاده داخل نایی سلول های بنیادی مزانشیمال مشتق شده از مغز استخوان (BM-MSCs) در مدل تجربی آسیب حاد ریوی (ALI) در گوسفند
- رشته تحصیلی
- دامپزشکی
- مقطع تحصیلی
- دکتری عمومی
- محل دفاع
- کتابخانه دانشکده دامپزشکی شماره ثبت: 3654;کتابخانه دانشکده دامپزشکی - مخزن مرد آباد شماره ثبت: 3654;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 75909;کتابخانه دانشکده دامپزشکی شماره ثبت: 3654;کتابخانه دانشکده دامپزشکی - مخزن مرد آباد شماره ثبت: 3654;کتاب
- تاریخ دفاع
- ۲۸ شهریور ۱۳۹۵
- دانشجو
- شکوفه یداللهی
- استاد راهنما
- محمدرضا مخبردزفولی, سیروس صادقیان چالشتری
- چکیده
- التهاب حاد ریه (ALI) و/یا سندرم زجر تنفسی حاد (ARDS)، مجموعه ای از نشانه ها و علائم بالینی حاد ریوی است که منجر به اختلال در یکپارچگی بستر مویرگی – آلوئولی و متعاقب آن نشت مایعات در فضای آلوئولی می شود. تا کنون استراتژی درمانی خاصی برای ALI و/یا ARDS یافت نشده است. استفاده از سلول های بنیادی مزانشیمال برای درمان ضایعات ریوی و بهبود آسیب تبدیل به رویکرد درمانی امیدبخشی شده است. هدف از مطالعه حاضر، بررسی عملکرد سلول های بنیادی مزانشیمی مشتق شده از مغز استخوان در روند ترمیم آسیب حاد ریوی ایجاد شده با LPS باکتری ایکلای است. در این مطالعه، تعداد 10 راس گوسفند نر نژاد شال در محدوده سنی 4-3 ماهه انتخاب و بطور تصادفی به دو گروه پنج راسی درمان و شاهد تقسیم شدند و توسط تزریق LPS باکتری ایکلای به صورت داخل نایی مدل تجربی آسیب حاد ریه با مشاهده علائم بالینی و تایید تصویر رادیوگرافی ایجاد شد. سپس از گوسفندان در گروه درمان، نمونه مغز استخوان اخذ شد. سلول های بنیادی مزانشیمی در اتاق تمیز پژوهشکده زیست پزشکی دانشکده دامپزشکی دانشگاه تهران جداسازی و کشت داده شد و تعداد سلول ها برای هر گوسفند به 107×5 سلول رسانده شد و سپس به صورت داخل نایی به گوسفندان پیوند خودی زده شدند. در مقابل در گروه شاهد به هر گوسفند 10 میلی-لیتر PBS به صورت داخل نایی تزریق شد. به منظور بررسی اثرات سلول درمانی، علائم بالینی قبل و بعد از پیوند سلول های بنیادی یا تزریق PBS در هر دو گروه درمان و شاهد ثبت شد. همچنین در زمان های قبل و 24، 48، 72 و 168 ساعت پس از پیوند سلول های بنیادی یا تزریق PBS نمونه شستشوی برونشی حبابچه ای (BAL) برای بررسی غلظت IgM، آلبومین و میزان پروتئین تام اخذ گردید. این سه فاکتور شاخص هایی برای ارزیابی میزان یکپارچگی سد مویرگی-آلوئولی هستند که میزان آنها به روش الایزا تعیین شد. نتایج نشان داد که پیوند سلول های بنیادی توانسته شدت علائم بالینی ایجاد شده توسط LPS را کاهش دهد بطوریکه تقریبا پس از سه روز از پیوند سلول های بنیادی، وضعیت بالینی گوسفندها، بر خلاف گروه شاهد طبیعی بود. همچنین سلول های بنیادی توانسته بودند غلظت IgM، آلبومین و میزان پروتئین تام که در اثر التهاب افزایش یافته بودند را بطور معناداری کاهش دهند. این کاهش معنادار در مقایسه دو گروه نیز کاملا مشهود بود (P<0.05). این نتایج نشان می دهند که سلول های بنیادی مزانشیمی توانسته اند میزان یکپارچگی سد مویرگی-آلوئولی را بهبود بخشند و در ترمیم آسیب ریه نقش بسزایی ایفا کنند.
- Abstract
- The acute respiratory distress syndrome (ARDS), a clinical complication of severe acute lung Injury ALI is characterized by disruption of the lung alveolar–capillary membrane barrier and resultant pulmonary edema associated with a proteinaceous alveolar exudate. Current specific treatment strategies for ALI/ARDS are lacking. The use of mesenchymal stem cells in the treatment of lung injury and recovery has become a promising therapeutic approach. The purpose of this study is to evaluate the performance of mesenchymal stem cells derived from bone marrow in healing acute lung injury caused by LPS of E.Coli. In this study, 10 male sheep 3-4 months old Shall strain were selected and randomly were divided into two groups of five treatment and control. By endotracheal injection of E.Coli LPS was induced an experimental model of acute lung injury and confirmed by registration of clinical signs and radiographic image. Then in the treatment group, bone marrow mesenchymal stem cells were collected and after isolation and cultivation in clean room of biology-medicine Institute of Tehran university. The number of cells for each sheep was brought to 5 * 107 cells. In control group 10ml intra-tracheal PBS was injected. In order to evaluate effects of cell therapy, clinical signs before and after stem cell transplant or PBS injection were recorded in both treatment and control groups. Also, before and 24, 48, 72 and 168 hours after stem cell transplantation or PBS infusion. Sample of bronchoalveolar lavage (BAL) were obtained to measure the concentration of IgM, albumin and total protein. Considering that total protein, albumin and IgM are indicators of inflammation and pulmonary involvement, to investigate the three factors were assessed by ELISA Kit . the results showed that transplanted stem cells could reduce the severity of clinical sign that generated by LPS. So that nearly three days after stem cell transplantation, the clinical sign unlike in control group was normal. The stem cells could reduce concentration of IgM, albumin and total protein that significantly increased in lung inflammation. This significant reduction was evident in the two groups (P <0.05). These results suggest that mesenchymal stem cells could improve the capillary-alveolar barrier integrity and play a significant role in the repair of lung injury. Key words: Acute lung injury, bone marrow, mesenchymal stem cells, the therapeutic effects.
