عنوان پایان‌نامه
ارزیابی حضور انگل نئوسپوراکنینوم در ارگانهای احشائی و مایع مغزی نخاعی سگهای ولگرد با Nested-PCR و مقایسه آن با نتایج سرولوژی
- رشته تحصیلی
- بیماری های داخلی دامهای کوچک
- مقطع تحصیلی
- دکترای تخصصی
- محل دفاع
- کتابخانه دانشکده دامپزشکی شماره ثبت: 660 ت;کتابخانه دانشکده دامپزشکی - مخزن مرد آباد شماره ثبت: 660 ت;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 75087;کتابخانه دانشکده دامپزشکی شماره ثبت: 660 ت;کتابخانه دانشکده دامپزشکی - مخزن مرد آباد شماره ثبت: 660 ت;
- تاریخ دفاع
- ۱۴ تیر ۱۳۹۵
- دانشجو
- علی پورامینی
- استاد راهنما
- شهرام جمشیدی, پرویز شایان
- چکیده
- زمینه مطالعه: نئوسپورا کنینوم یک تک یاخته کوکسیدیایی از خانواده سارکوسیستیده است. این تک یاخته باعث ایجاد مشکلات عصبی_عضلانی در سگ ها و سقط در گاو می شود. اکثر موارد آلودگی به این تک یاخته در سگ ها، باعث ایجاد عفونت های تحت بالینی می شود. هدف: در این مطالعه نتایج سرولوژی و مولکولی در بافت های مغز، عضلات اسکلتی، کبد، طحال، عقده های لنفاوی تحت فکی و مایع مغزی نخاعی در مبتلایان به شکل تحت بالینی نئوسپورا کانینوم در سگ های ولگرد مورد بررسی و مقایسه قرار گرفته است. روش مطالعه: معاینه بالینی بر روی 42 قلاده سگ ولگرد از نژاد مخلوط در استان تهران پس از ثبت مشخصات انجام شد. در ابتدا نمونه برداری از خون و مایع مغزی نخاعی به عمل آمد و پس از معدوم سازی به روش بدون درد، نمونه های مغز، عضلات اسکلتی، کبد، طحال و عقده های لنفاوی جمع آوری و تا زمان انجام آزمایشات در دمای 20- درجه سانتی گراد نگهداری شد. از کیت تجاری به روش الایزای غیرمستقیم جهت انجام آزمایش سرولوژی و از تکنیک Nested-PCR بر روی ژن Nc5 جهت بررسی مولکولی استفاده شد. نتایج: از 42 نمونه سرم مورد بررسی با کیت الایزای غیرمستقیم، در یک قلاده سگ نر هفت ساله (22/2%) عیار آنتی بادی وجود داشت. همچنین با استفاده از روش Nested-PCR، در 15 قلاده (35%) در حداقل یک نمونه، آلودگی به نئوسپورا کانینوم مشاهده شد. از میان نمونه های بررسی شده، بیشترین میزان آلودگی به ترتیب در عضلات اسکلتی (30%)، مایع مغزی_نخاعی (2/26%)، مغز (19%)، کبد (14/7%) و عقده های لنفاوی زیر فکی (76/4%) مشاهده گردید. در هیچیک از نمونه های بدست آمده از طحال آلودگی مشاهده نشد. نتیجه گیری نهایی: در عضلات اسکلتی بیشترین میزان آلودگی با استفاده از روش مولکولی مورد تشخیص قرار گرفت. در عین حال بر اساس نتایج حاصل، روش مولکولی از حساسیت به مراتب بیشتری نسبت به روش سرولوژی در تشخیص سگ های آلوده به شکل تحت بالینی نئوسپوروز برخوردار است.
- Abstract
- Backgrounds: Neospora caninum is an Apicomplexan parasite. It causes paralysis and neuromuscular disorders in dogs and abortion in cattle. Although contamination with N. caninum is common in stray dogs, most of the dogs are infected with subclinical neosporosis. Objectives: The objective of this study was to evaluate the presence of N. caninum in multiple tissues and cerebrospinal fluid (CSF) using Nested-PCR technique. Furthermore, the N. caninum specific antibody was detected in serum of examined dogs by indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Methods: Forty two stray dogs of mixed breeds captured from districts of Tehran, Iran, were examined physically and euthanized. A commercially indirect ELISA kit was used to detect the anti-N. caninum antibodies in sera. Nested PCR was applied to analyze the extracted DNA from brain, skeletal muscle, CSF, liver, spleen and mandibular lymph nodes for Nc5 gene. Results: Indirect ELISA assay for N. caninum antibody was positive in a seven years old male dog (2.22%). Out of 42 stray dogs whose multiple organs were examined using Nested PCR, 15 samples (35%) were positive. The highest presence of N. caninum was found in skeletal muscle with 30% (13/42) frequency, followed by CSF (26.2%) (11/42), brain (19%) (8/42), liver (7.14%) (3/42), lymph node (4.62%) (2/42) and spleen samples (0/42). Conclusions: These results suggest that the highest presence of N. caninum is seen in skeletal muscle, CSF and brain in asymptomatic infected dogs respectively. Nested-PCR could be considered as sensitive method to detect N. caninum in subclinical infected dogs.
