عنوان پایان‌نامه
مقایسه میزان حساسیت کشت سلول و آزمون Real Time PCR در تشخیص کلامیدیا آبورتوس
- رشته تحصیلی
- دامپزشکی
- مقطع تحصیلی
- دکتری عمومی
- محل دفاع
- کتابخانه دانشکده دامپزشکی شماره ثبت: 3512;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 63947;کتابخانه دانشکده دامپزشکی - مخزن مرد آباد شماره ثبت: 3512
- تاریخ دفاع
- ۱۵ تیر ۱۳۹۳
- دانشجو
- مونا حامدی
- استاد راهنما
- حسین اسمعیلی
- چکیده
- تشخیص سقط جنین انزئوتیک براساس جداسازی باکتری، شناسایی جرم یا اسید نوکلئیک آن در جنین سقط شده و یا ترشحات واژن دامی است که به تازگی سقط کرده باشد. آزمون های سرم شناسی ویژگی کافی برای تفریق بین کلامیدیا آبورتوس و کلامیدیا پکوروم و همینطور برخی از باکتری های گرم منفی دیگر را ندارند و نمی توانند دام واکسینه را از دام آلوده تفریق نمایند. در بررسی حاضر حساسیت کشت سلول و آزمون Real Time PCR درتشخیص کلامیدیا آبورتوسمورد ارزیابی قرار گرفت. 28 نمونه سواب واژن و ملتحمه چشم میش ها و ماده بزهای تازه سقط کرده که از لحاظ آلودگی به بروسلوز منفی بودند، به سلول‌هایMcCoy تلقیح گردید و همزمان با استفاده از روش Real-time PCR نیز مورد آزمون قرار گرفتند. در آزمون Real-time PCR، 18 نمونه مثبت و 10 نمونه منفی بود و در روش کشت سلول، کلامیدیا آبورتوس از 7 نمونه جداسازی گردید. حساسیت و ویژگی روش کشت سلول در این مطالعه به ترتیب برابر با 9/38% و 100% بود. تمامی نمونه هایی که در کشت مثبت بودند، در روش Real-time PCR نیز مثبت تشخیص داده شدند و هیچ یک از نمونه هایی که در Real-time PCR منفی بودند در کشت سلول مثبت نشدند، البته 11 مورد در Real-time PCR مثبت تشخیص داده شدند که کشت، آن ها را منفی اعلام کرده بود. روش جداسازی کلامیدیا آبورتوس، اگرچه دارای ویژگی 100% است، اما به دلیل محدودیت هایی چون حساسیت پایین، زمان بر بودن، هزینه بر بودن و احتمال بالای آلودگی، برای تشخیص های معمول آزمایشگاهی مناسب نمی باشد، لذا توصیه می شود که از روش هایی چون Real-time PCR که دارای حساسیت و ویژگی بالایی است، در این خصوص استفاده گردد.
- Abstract
- Diagnosis of Enzootic Abortion depends on isolation and detection of the agent or its nucleic acid in the products of abortion or vaginal excretions of freshly aborted females. Serological tests are not wholly specific and cannot differentiate Chlamydia abortus, Chlamydia pecorum and some gram negative bacteria from each other, in addition they cannot distinguish between vaccinated and infected responses. In this study, sensitivity of cell culture isolation and Real-time PCR were assessed for detection of Chlamydia abortus. 28 vaginal and conjunctival swabs’ samples have been selected from ewes and female goats that have recently aborted and been negative to brucella, were inoculated to McCoy cells and simultaneously were tested with Real-time PCR. In Real-time PCR, 18 samples were positive and 10 of them were negative. In cell culture, Chlamydia were disparted from 7 samples. In this study, sensitivity and specificity of cell culture were 38.9% and 100% respectively. All positive samples in cell culture were positive in Real-time PCR too, and none of negative Real-time PCR samples were isolated in cell culture. However, 11 samples were positive in Real-time PCR that cell culture could not detect them. Although the isolation of Chlamydia abortus have 100% specificity, because of some restrictions alike low sensitivity, time consuming, cost and high probability of contamination, it is not suitable for routine laboratory diagnosis. Therefore, applying other tests like Real-time PCR which have high sensitivity and specificity are recommended.
