عنوان پایان‌نامه
ارزیابی ویروس های انفلوانزای تحت تیپ H۹N۲ مرغداریها جهت بررسی مقاومت به داروهای مسدودکننده کانال یونی M۲ و مهارت کننده های نور آمینیداز
- رشته تحصیلی
- بیماریهای طیور
- مقطع تحصیلی
- دکترای تخصصی
- محل دفاع
- کتابخانه دانشکده دامپزشکی شماره ثبت: 588 ت;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 67211
- تاریخ دفاع
- ۲۳ مهر ۱۳۹۳
- دانشجو
- محمد ملکان
- استاد راهنما
- مهدی وصفی مرندی
- چکیده
- ویروس بیماری آنفلوانزای پرندگان (تحت تیپ H9N2) جزو ویروس های آنفلوانزای تیپ A بوده و در سال 1377 از مرغداریهای صنعتی ایران جدا شده و پس از آن مواردی مختلفی از همه گیری ها گزارش شده است. این بیماری علاوه بر اینکه راندمانهای تولیدی را تحت تاثیر خود قرار می دهد، می¬تواند با تلفات بالا موجب ضررهای اقتصادی سنگینی به پیکره صنعت طیور کشور شود. داروهای موثر در کنترل بیماری آنفلوانزا شامل دو دسته کلی داروهای مسدود کننده کانال یونی ام 2 و داروهای مهار کننده پروتئین نورآمینیداز می باشند. مصرف مداوم داروهای فوق میتواند باعث ایجاد مقاومت گردد. هدف از مطالعه حاضر بررسی حضور موتاسیونهای مسئول ایجاد مقاومت نسبت به داروهای مسدود کننده کانال یونی ام 2 و مهارکننده های نورآمینیداز می باشد. تعداد 100 نمونه بافتی از 15 گله در طول سال های 1391 و 1392 جمع آوری شده و پس از آماده سازی در تخم مرغ جنین دار 9 روزه کشت شدند. بعد از 5 روز مایع آلانتوئیک جنین ها برای انجام آزمون هماگلوتیناسیون استفاده شدند. حضور ویروس تحت تیپ H9N2 آنفلوانزا در نمونه های دارای خاصیت هماگلوتیناسیون با استفاده تست RT-PCR اختصاصی تحت تیپ H9 و N2 تائید شدند. ژنهای M، HA و NA ویروسهای تائید شده با استفاده از پرایمرهای اختصاصی تکثیر و بعد ار آن تعیین توالی گردید. توالی های بدست آمده توسط آنالیزهای بیوانفورماتیکی مورد ارزیابی قرار گرفتند. 6 جدایه ویروسی تحت تیپ H9N2 از نمونه های سال 1392 و 5 جدایه از نمونه های سال 1391 جداسازی گردید. 4 نمونه از 6 نمونه سال 1392 و 4 نمونه از 5 نمونه جدا شده در سال 1391 دارای موتاسیونهای مسئول مقاومت به داروهای مسدود کننده کانالی یونی ام 2 بودند. هیچ کدام از نمونه های ویروسی جداشده در مطالعه حاضر دارای موتاسیون مسبب بروز مقاومت نسبت به داروهای مهار کننده نورآمینیداز نبودند.
- Abstract
- Avian Influenza viruses are belonged to subtype H9N2 of type A of Influenza viruses. H9N2 Subtype was isolated at 1998 in Iran and since then, several outbreaks in Iranian poultry flocks has been reported. Avian influenza affects performance of poultry flocks and may cause high mortalities and heavy economic losses. There are two groups of drugs which are effective on influenza viruses, first group is M2 blocker drugs and second group is NA inhibitors. Continuous usage of these drugs may cause resistance. The main goal of current study is to evaluate mutations which are responsible to resistance against M2 blocker drugs and NA inhibitors. 100 specimens from 15 flocks collected during 2012 and 2013. Each specimen prepared and cultured in 9 days old chicken embryo. After 5 days allantoic fluid was collected and used for haemagglutination test. H9N2 subtype was confirmed by specific RT-PCR of H9 and N2. Specific RT-PCR was conducted for M, HA and NA genes of confirmed viruses. Then PCR products were used for sequencing. Bioinformatic softwares were used for analysis. 6 isolates were belonged to 2013 and 5 were belonged to 2012. 4 specimens out of 6 in 2013 and 4 specimens out of 6 in 2012 isolates had mutations responsible to M2 blocker drug resistance. None of them had Na inhibitor resistance mutations.
