عنوان پایان‌نامه

بررسی اثر Knockout Sevum Re Placementksr در مقایسه با سرم جنین گاوی FBS بر کلونی زایی سلول های بنیادی اسپرماتوگونیال گوساله پس از هم کشتی با سلول های سرتولی



    دانشجو در تاریخ ۰۲ اسفند ۱۳۹۴ ، به راهنمایی ، پایان نامه با عنوان "بررسی اثر Knockout Sevum Re Placementksr در مقایسه با سرم جنین گاوی FBS بر کلونی زایی سلول های بنیادی اسپرماتوگونیال گوساله پس از هم کشتی با سلول های سرتولی" را دفاع نموده است.


    رشته تحصیلی
    مامائی و بیماریهای تولید مثل دام
    مقطع تحصیلی
    دکترای تخصصی
    محل دفاع
    کتابخانه دانشکده دامپزشکی شماره ثبت: 639 ت;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 74843;کتابخانه دانشکده دامپزشکی - مخزن مرد آباد شماره ثبت: 639 ت;کتابخانه دانشکده دامپزشکی شماره ثبت: 639 ت;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 74843;کتابخانه
    تاریخ دفاع
    ۰۲ اسفند ۱۳۹۴
    دانشجو
    رضا یوسفی
    استاد راهنما
    پرویز تاجیک
    چکیده
    لینک فایل چکیده
    هدف از مطالعه حاضر بررسی تأثیر Knockout Serum Replacement (KSR) در مقایسه با سرم جنین گاوی (FBS) بر هم‎ کشتی سلول‎ های بنیادی اسپرماتوگونیال و سرتولی در گاو می‎باشد. سلول‎های اسپرماتوگونی از بیضه گوساله‎های 3 تا 5 ماهه جدا شده و به صورت هم‎کشتی با سلول‎های سرتولی در محیط حاوی 10 درصد FBS، 10 درصد KSR و 20 درصد KSR به مدت 12 روز کشت داده شدند. در این مطالعه کلونی‎زایی سلول‎های بنیادی اسپرماتوگونی با استفاده از میکروسکوپ معکوس، بیان ژن Thy-1 با استفاده از تکنیک PCR زمان واقعی کمی مورد ارزیابی قرار گرفتند. ماهیت سلول‎های بنیادی اسپرماتوگونی با رنگ آمیزی ایمونوفلورسانت علیه Thy-1 که مارکر اختصاصی این سلول‎ها هستند تایید شد. داده‎ها با استفاده از نرم افزار SAS نسخه 2/9 مورد ارزیابی آماری قرار گرفتند. تفاوت‎ها با 05/0 > P به لحاظ آماری معنی‎دار در نظر گرفته شدند. نتایج این مطالعه نشان داد که جایگزین کردن FBS با KSR باعث افزایش تعداد کلونی‎ها و افزایش قطر کلونی‎ها می‎شود. به علاوه مطالعه حاضر نشان داد که KSR در مقایسه با FBS سبب افزایش بیان ژن Thy-1 می‎شود. به طور خلاصه، بر اساس نتایج بدست آمده در این مطالعه می‎‎توان بیان نمود که افزودن KSR به محیط کشت سلول‎های اسپرماتوگونی گاوی منجر به تقویت تکثیر، تقویت خودافزایی و افزایش کلونی‎زایی این سلول‎ها می‎شود. نتایج این مطالعه نشان می‎دهد که KSR در مقایسه با FBS مواد مورد نیاز برای رشد و تکثیر سلول‎های بنیادی اسپرماتوگونیال را بهتر فراهم می‎کند.
    Abstract
    The present study was conducted to investigate the effect of knockout serum replacement (KSR) compared with fetal bovine serum (FBS) on cocultured of spermatogonial stem cells (SSCs) with Sertoli cells. SSCs were harvested from 3 to 5-month-old calves and were cultured using media containing 10% FBS, 10% KSR and 20% KSR for 12 days. In the present study, the colonization of SSCs and the expression of Thy-1 were assessed using invert microscope and real time PCR, respectively. The presence of SSCs was confirmed by immunocytochemistry using Thy-1 antibody. Data were analyzed using SAS version 9.2. Differences were considered significant at P < 0.05. The results of the present study showed that replacement of FBS with KSR could increase the number and size of SSC colonies. In addition, the present study revealed that KSR as compared with FBS could increase the expression of Thy-1. In conclusion, based on the results of the present study, it could be stated that addition of KSR to culture media of bovine SSCs could enhance the proliferation and self-renewal and colonization of SSCs. The results showed that KSR provide the requirements for proliferation of SSCs better that FBS.