عنوان پایان‌نامه

تاثیرات ATP لیپوزوم بر روی کشت سلولهای فیبروبلاست



    دانشجو در تاریخ ۰۲ اسفند ۱۳۹۴ ، به راهنمایی ، پایان نامه با عنوان "تاثیرات ATP لیپوزوم بر روی کشت سلولهای فیبروبلاست" را دفاع نموده است.


    رشته تحصیلی
    دامپزشکی
    مقطع تحصیلی
    دکتری عمومی
    محل دفاع
    کتابخانه دانشکده دامپزشکی شماره ثبت: 3632;کتابخانه دانشکده دامپزشکی - مخزن مرد آباد شماره ثبت: 3632;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 72939;کتابخانه دانشکده دامپزشکی شماره ثبت: 3632;کتابخانه دانشکده دامپزشکی - مخزن مرد آباد شماره ثبت: 3632;کتاب
    تاریخ دفاع
    ۰۲ اسفند ۱۳۹۴
    دانشجو
    حمید تقی پور
    استاد راهنما
    سیدمهدی قمصری, محمدمهدی دهقان
    چکیده
    لینک فایل چکیده
    در شرایط هیپوکسی میزان ATP تولید شده، جهت فعالیت های طبیعی و فرآیند های التیامی سلول کافی نیوده و در نهایت منجر به مرگ سلول می شود. مولکولATP آبدوست و دارای بار منفی است و همچنین ATP آزاد به سرعت تحت تاثیر آنزیم ها هیدرولیز شده و در نتیجه انتقال مستقیم آن به تنهایی به داخل سلول مقدور نمی باشد. بدین منظور پیشنهاد شده است که از حامل های نانو لیپوزومی جهت محافظت و انتقال ATP به سلول های فیبروبلاست استفاده شود. از آنجایی که ممکن است این لیپوزوم های حاوی ATP خود اثر سویی برسلول ها ی کلیدی در فرآیند التیام زخم داشته باشند، در این مطالعه اثر لیپوزوم های حاویATP بر فیبروبلاست ها در خارج از بدن( Iinvitro) با استفاده از روش آزمایش متیل تیازولیل فنیل تترازولیوم بروماید (MTT) مورد بررسی قرار گرفته است. لیپوزوم های حاوی ATP با سایز بین 50 تا 100 نانومتر و زتا پتانسیل منفی 3 تا 6 میلی ولت تولید شد پس از کشت فیبروبلاست ها سمیت نانو لیپوزوم های حاوی ATP در غلظت های مختلف مورد بررسی قرار گرفت تا میزان تاثیر لیپوزوم های حاوی ATP را بر روی تکثیر و تزاید فیبروبلاست در خارج از بدن مورد بررسی قرار گیرد. در این روش از سلول های فیبروبلاست پوستی موش سوری تهیه شده از انیستیتو پاستور استفاده شد که پس از پاساژ و کشت سلول ها از آزمون متیل تیازولیل فنیل تترازولیوم بروماید، برای بررسی سمیت مورد ارزیابی قرار گرفت. همچنین سلول ها بعد از مواجهه با رقت های مختلف از نظر مورفولوژی در زیر میکروسکوپ نیز مورد بررسی قرار گرفتند. این آزمون شامل چهار گروه مختلف بود، گروه اول شامل سلول های فیبروبلاست و ATP ، گروه دوم شامل سلول های فیبروبلاست و ATP لیپوزوم ، گروه سوم شامل سلول های فیبروبلاست و لیپوزوم بود و گروه چهارم که بعنوان گروه کنترل در نظر گرفته شد ، فقط شامل سلول های فیبروبلاست بود. با توجه به نتایج و میزان رشد سلول ها اختلاف معنی داری بین میزان رشد سلول ها در بین غلظت های مختلف ATPو ATP لیپوزوم و لیپوزوم و گروه کنترل مشاهده نشد(P > 0/05). در مجموع نتایج حاصل از این مطالعه توکسیک نبودن ATP، ATP لیپوزوم و لیپوزوم آزاد را تایید کرد.
    Abstract
    One of the major pathophysiologic events in slow- or non-healing wounds is a deficient bloodsupply; the affected tissue exists in a partially ischemic state. This decreased blood andoxygen delivery to the wound cells results in a significant decrease in cellular energy supply, which negatively impacts nearly every aspect of the healing process. Energy is needed for every phase of the wound healing process, and the decreased availability of ATP negatively impacts nearly every aspect of the healing process. Intracellular delivery of ATP into the cells of zone of stasis may bypass the need for a fully intact blood circulation and provide much needed energy to all of the energy-starved cells to facilitate burn wound healing. We believed that, by supplementing energy supply, the wound healing process may be improved. We developed specially formulated small unilamellar liposomes for intracellular Mg-ATP delivery. We have developed a new intracellular ATP delivery technique in which highly fusogenic lipid vesicles (ATP-vesicles) are used to encapsulate liposome-adenosine triphosphate (liposome - ATP). When these lipid vesicles are in contact with the cell membrane, they fuse together and deliver their contents into the cytosol. The direct intracellular delivery of ATP may circumvent tissue ischemic damage. One of the important aspect of this ATP-liposome is; review in vitro risk of toxicity of this liposome on cells. In this test we culture the fibroblast cell in 96 jet plate and then use ATP and ATP-liposome as matter that should be tested for risk of toxicity. We use MTT assaye for after encounter of this matter to cells we addition the MTT salt to each well of plate and then read the plate in Eliza reader in 630 nm. In this study we have four group including: free ATP, ATP-LIP , LIP and a group as control group just with cell without any addition material. there is no specific difference between groups it means that ATP , ATP-LIP, LIP haven’t any toxicity on cell growth. But LIP and ATP-LIP in their upper concentration have better growth that it can be cause of similarity of liposome to the cell membrane that it can help cell division.