عنوان پایان‌نامه

مقایسه پلی مورفیسم توالی نوکلئوتیدی ژن پروتئین غشای انگل تیلریا (TaSp) در تیلریا آنولاتا، تیلریا لستوکاردی و تیلریا اویس



    دانشجو در تاریخ ۲۷ بهمن ۱۳۹۴ ، به راهنمایی ، پایان نامه با عنوان "مقایسه پلی مورفیسم توالی نوکلئوتیدی ژن پروتئین غشای انگل تیلریا (TaSp) در تیلریا آنولاتا، تیلریا لستوکاردی و تیلریا اویس" را دفاع نموده است.


    رشته تحصیلی
    انگل شناسی دامپزشکی
    مقطع تحصیلی
    دکتری تخصصی PhD
    محل دفاع
    کتابخانه دانشکده دامپزشکی - مخزن مرد آباد شماره ثبت: 636 ت;کتابخانه دانشکده دامپزشکی شماره ثبت: 636 ت;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 77205;کتابخانه دانشکده دامپزشکی - مخزن مرد آباد شماره ثبت: 636 ت;کتابخانه دانشکده دامپزشکی شماره ثبت: 636 ت;
    تاریخ دفاع
    ۲۷ بهمن ۱۳۹۴
    دانشجو
    صدیقه جعفری اسکری
    استاد راهنما
    پرویز شایان
    چکیده
    لینک فایل چکیده
    مقدمه و ضرورت انجام مطالعه: تیلریوز گوسفندی یک بیماری تک یاخته ای مهم در گوسفند و بزها در مناطق گرمسیری و تحت گرمسیری می باشد که سالیانه خسارت اقتصادی فراوانی را به صنعت دامپروری وارد می کند. هدف مطالعه: در مطالعات مختلفی پروتئین سطحی ماکروشیزونت تیلریا آنولاتا (TaSp) جهت تشخیص سرولوژیکی تیلریوز در میزبانان مهره دار مورد استفاده قرار گرفته و به عنوان یک پروتئین بسیار ایمنوژن و مناسب جهت تشخیص سرولوژیکی تیلریوز معرفی شده است. از آنجایی که توالی آمینواسیدی پروتئین TaSp حداقل در قسمتی از آن در گونه های تیلریا آنولاتا، تیلریا لستوکاردی و تیلریا چاینا 1 و 2 بسیار شبیه هم هستند لذا به منظور تشخیص سرولوژیکی تیلریوز با استفاده از این پروتئین در نشخوارکنندگان کوچک و حذف واکنش های متقاطع و پاسخ های مثبت و منفی کاذب، تعیین توالی اسید امینه ای این پروتئین در تیلریا اویس کاملا ضروری می باشد. مواد و روش کار: در این مطالعه ابتدا با استفاده از پرایمرهای اختصاصی مستخرج از ژن 18s rRNA و انجام PCR، گونه های مختلف تیلریا مشخص گردید. از آنجایی که تاکنون توالی نوکلئوتیدی این ژن TaSp در تیلریا اویس مشخص نگردیده است، با استفاده از توالی های ثبت شده سایر گونه های تیلریا در بانک ژن، پنج جفت پرایمر از قسمت های مختلف ژن TaSp در این گونه ها که بیشترین شباهت را با هم داشتند طراحی و جهت انجام PCR روی ژن مذکور در تیلریا اویس مورد استفاده قرار گرفتند. یافته ها: در این مطالعه توالی نوکلئوتیدی و آمینواسیدی پروتئین سطحی تیلریا اویس (ToSp) برای نخستین بار مشخص گردید. مقایسه توالی نوکلئوتیدی این ژن ToSp در مقایسه با ژن TaSp گونه های تیلریا آنولاتا (accession No: AJ316260.1) ، تیلریا چاینا 1 (AY274329.1) ، تیلریا چاینا 2 (DQ120058.1) و تیلریا لستوکاردی (EF092924.1) ثبت شده در بانک ژن، به ترتیب 96، 96، 99 و 86 درصد شباهت را نشان داد. همچنین توالی اسید امینه ای این پروتئین ToSp در مقایسه با توالی اسید امینه ای گونه های تیلریا آنولاتا (accession No: CAC87478.1) ، تیلریا چاینا 1 (AAP36993.1) ، تیلریا چاینا 2 (AAZ30365.1) و تیلریا لستوکاردی (AAP36999.11) به ترتیب 95، 81، 98 و 70 درصد شباهت را نشان داد. تفاوت ها مشخصا در ناحیه N-terminus ژن ها وجود داشت. نتیجه گیری: با توجه به نتایج حاصل از مقایسه توالی آمینواسیدی این پروتئین سطحی در گونه های تیلریا و تفاوت های مشخص در ناحیه N-terminus این ژن، می توان با ساخت پروتئین نوترکیب از این ناحیه متفاوت، با استفاده از روش های سرولوژیکی ضمن تشخیص تیلریوز، واکنش های متقاطع بین گونه ای در آنها را نیز حذف نمود.
    Abstract
    Background: Ovine theileriosis is an important hemoprotozoal disease of sheep and goats in tropical and subtropical regions which caused high economic loses in livestock industry. Methods: Theileria annulata surface protein (TaSp) was used previously as a tool for serological analysis in livestock. Since the amino acid sequences of TaSp is at least in part very conserved in T. annulata, T. lestoquardi and T. china I and II, there is very important to determine the amino acid sequence of this protein in T. ovis as well, to avoid false interpretation of serological data based on this protein in small ruminant. In the present study the nucleotide sequence and amino acid sequence of Theileria ovis surface protein (ToSp) were determined. Results: The comparison of the nucleotide sequence of ToSp showed 96%, 96%, 99% and 86% homology to the corresponding nucleotide sequence of TaSp genes by T. annulata, T. China I, T. China II and T. lestoquardi, previously registered in GenBank under accession nos. AJ316260.1, AY274329.1, DQ120058.1 and EF092924.1 respectively. The amino acid sequence analysis showed 95%, 81%, 98% and 70% homology to the corresponding amino acid sequence of T. annulata, T chinaI, T china II and T. lestoquardi, registered in GenBank under accession nos. CAC87478.1, AAP36993.1, AAZ30365.1 and AAP36999.11 respectively. Conclusion: Interestingly, in contrast to the C-terminus, a significant difference in amino acid sequence in the N-teminus of the ToSp protein could be determined compared to the other known corresponding TaSp sequences, which make this region attractive for designing of a suitable tool for serological diagnosis.