عنوان پایان‌نامه

ارزیابی سطح آنکسین نوع ۱و۲ در مایع شستشوی برونشی حبابچه ای در ذات الریه تجربی با پاستورلا مولتسیدا در گوساله هاو مقایسه آن با گروه شاهد




    محل دفاع
    کتابخانه دانشکده دامپزشکی شماره ثبت: 647 ت;کتابخانه دانشکده دامپزشکی - مخزن مرد آباد شماره ثبت: 647 ت;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 73324;کتابخانه دانشکده دامپزشکی شماره ثبت: 647 ت;کتابخانه دانشکده دامپزشکی - مخزن مرد آباد شماره ثبت: 647 ت;
    تاریخ دفاع
    ۱۹ اسفند ۱۳۹۴
    دانشجو
    مسعود دوستی
    استاد راهنما
    محمدرضا مخبردزفولی

    آنکسین ها، پروتئین های مهمی هستند که از کشف آن ها بیش از چند دهه نمی گذرد و نقش های حیاتی موثری را در بدن موجودات زنده برعهده دارند. از جمله این آنکسین ها، آنکسین آ-1 و آنکسین آ-2 را می توان نام برد. از طرفی یکی از بیماری های مهم که می تواند عامل مرگ و میر در صنعت گاوداری باشد بیماری های تنفسی است .پاستورلا مولتیسیدا به عنوان معمول ترین بیماریزای باکتریایی مطرح بوده و شیوع بالایی را در پنومونی ها به خود اختصاص می دهد. هدف از این مطالعه تعیین آنکسین آ-1 و آنکسین آ-2 در مایعات حاصل از شستشوی برونشی حبابچه ای گوساله های مبتلا به پنومونی به صورت تجربی با باکتری پاستورلا مولتیسیدا بوده است. در تحقیق حاضر تعداد 10 راس گوساله نر در محدوده سنی دو تا چهار ماهه انتخاب و آن ها را به دو گروه مساوی تقسیم نموده، به یک گروه به عنوان گروه تیمار، باکتری پاستورلا مولتیسیدایی که قبلاً از ریه گوساله ای مبتلا به پنومونی جدا شده بود، به میزان 300 سی سی در رقت CFU/ml 109 × 2 و به گروه شاهد 300 سی سی نرمال سالین از راه دهان و توسط کاتتر مخصوص لاواژ در ناحیه نای تلقیح گردید. بر اساس جداول مخصوص، امتیازات بالینی هر 6 ساعت ثبت گردید و حدود 18 تا 24 ساعت پس از تلقیح باکتری در گوساله های گروه تیمار علائم بالینی پنومونی دیده شد. در این زمان خون گیری از ورید وداج انجام شده و شستشوی برونشی حبابچه ای (BAL) جهت سلول شناسی و آزمایش باکتری شناسی از مایعات حاصل از شستشو انجام گردید. مایعات حاصل از شستشوی برونشی حبابچه ای را درg 8000× به مدت 30 تا 45 دقیقه در 4 درجه سانتی گراد سانتریفوژ نموده و میزان آنکسین آ-1 و آنکسین آ-2 در مایعات رویی و رسوبی حاصل از آن بطور جداگانه مشخص گردید. ضمناً از هر کدام از گوساله ها به میزان 10 میلی لیتر خون در لوله های فاقد ماده ضد انعقاد، اخذ شد و ارزیابی آنکسین آ-1 و آنکسین آ-2 در مورد سرم خون نیز انجام شد. نتایج بدست آمده در مورد مایعات رویی و رسوبی BAL و در سرم خون نشان داد که در هر سه نمونه، میانگین آنکسین آ-1 و آ-2 در گروه تیمار نسبت به گروه شاهد افزایش نشان داده و با ارزیابی میزان آنکسین آ-1 و آ-2 در دو گروه تیمار و شاهد به کمک آزمون تی مستقل مشخص گردید که بین میزان آنکسین آ-1 و آ-2 در دو گروه تیمار و شاهد تفاوت آماری معنی داری (p<0.05) وجود دارد. نتایج نشان می دهند که از تغییرات این آنکسین ها به عنوان بیومارکری ( چه در مایع BAL و چه در سرم خون ) در موارد التهابی مثل پنومونی می توان بهره جست.
    Abstract
    Annexins are important proteins which discovered in few passed decades. Also, they play important vital roles in alive creatures. Among these annexins, Annexin A1 and Annexin A2 can be named. On the other hand, one of the important diseases that is the agent of mortality in livestock industry is respiratory diseases. Pasturella multicida is most common bacterial pathogenic and it has high prevalence in pneumonia diseases. The aim of this study was estimated of annexin A1 and annexin A2 In broncho alveolar lavage fluids in calves affected from experimentally pneumonia by pasturella multicida bacteria. In this research, 10 male calves were elected that they were 2 to 4 months and they were divided into 2 quintuple group. The case group was inoculated about 300 cc in dilution 2 × 10 9 CFU Pasturella multicida bacteria that formerly was isolated from the lung of a calf suffered pneumonia. For control group 300cc Normal saline was inoculated orally through the special lavage catteter. According special tables, clinical scores were recorded every 6 hours and about 18 to 24 hours after bacterial inoculation of case group calves, pneumonia clinical signs were diagnosed. During the above mentioned hours, the blood of jugular vein was collected. Also, bronchoalveolar lavage (BAL) was done for cytology and bacteriology from washing BAL fluids results. The fluid results of bronchoalveolar lavage was centrifuged in × 8000 g about 30 to 45 minutes in 4 degree centigrade; annexin A1 and annexin A2 were distinguished in supernatant and sediment BAL Fluids. It should be mentioned that about 10 ml blood was collected from each calf in anti- coagulant tubes. Annexin A1 and A2 were evaluated in blood serum. The results of supernatant, sediment BAL Fluids and blood serum were shown that in all three samples, the Annexin A1 and A2 means in case group increased in compare with control group. Also, according to independent t- test, the evaluation of both Annexin A1 and A2 in case and control groups shows that there is a significant statistical difference (p? 0.05). The results were proved that the above annexins differences can be used as a biomarker (in both BAL fluids and blood serum) in inflammation cases such as pneumonia.