عنوان پایان‌نامه
ریخت شناسی و تعیین هویت مولکولی ایزوسپورا در مینای معمولی(Acrido theres Tristis)با استفاده از جایگاه ۱۸sr RNA
- رشته تحصیلی
- دامپزشکی
- مقطع تحصیلی
- دکتری عمومی
- محل دفاع
- کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 71787;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 71787
- تاریخ دفاع
- ۰۵ دی ۱۳۹۴
- دانشجو
- الیاس شاکری
- استاد راهنما
- سید احمد مدنی, فاطمه عرب خزائلی
- چکیده
- ضرورت انجام مطالعه: ایزوسپورا از اعضای خانواده ی ایمریده، یکی از شایع ترین انگل های کوکسیدیایی در گنجشک سانان می باشد. با توجه به اطلاعات بسیار اندکی که در مورد ایزوسپورا در پرندگان خانگی رایج در ایران در دسترس است و نیز با توجه به این که در هیچ جای دنیا مینای معمولی به اندازه ایران به عنوان پرنده خانگی رواج ندارد، اطلاعات در مورد انگل های این گونه میزبانی نیز بسیار اندک و نیازمند مطالعات گسترده می باشد. هدف مطالعه: در این طرح تلاش شد تا اُاُسیست های ایزوسپورایی جداشده از پنج مینای معمولی، ابتدا از نظر ریخت شناسی و سپس با روش تعیین توالی در دو ژن 18SrRNA و COIمورد بررسی و شناسایی بیشتر قرارگیرند و جایگاه این انگل ها با منشأ مینای معمولی در خانواده ایمریده شفاف تر گردد. مواد و روش کار: از پنج مرغ مینای معمولی که آلوده به انگل های روده ای بودند نمونه های خون و مدفوع جدا گردید. از نمونه های خون گسترش تهیه شد و نمونه های مدفوعی که حاوی مقادیر زیادی اُاُسیست بود توسط میکروسکوپ مورد بررسی ریخت شناسی قرار گرفت. همچنین پس از استخراج DNA آزمایش PCR بر روی توالی 18SrRNA و COI انجام گرفت. پس از تعیین توالی های به دست آمده، نتایج با اطلاعات موجود در Genbank مقایسه و جایگاه این انگل در مقایسه با سایر گونه های ثبت شده در منابع علمی مقایسه گردید. یافته ها:گسترش های خونی تهیه شده از این پرندگان فاقد هرگونه مرحله شیزوگونی داخل مونوسیتی بودند.اُاُسیست های جدا شده از مینای معمولی در این مطالعه به شکل کروی تانسبتاً کروی با میانگین طول و عرض 3/23 × 3/22 میکرومتر و میانگین اندیس شکل 05/1 است. باقی مانده ی اُاُسیست، میکروپیل و گرانول های قطبی در اُاُسیست ها مشاهده نگردید. اُاُسیست های هر پنج مینا از نظر ریخت شناسی و اندازه اُاُسیست ها مشابه بودند (p<0.05). قطعاتی با وزن های 450 bpاز ژن 18SrRNA با شباهت 9/98-7/99 % و 300 bpاز جایگاه COI با شباهت 5/94-3/99 % با توالی های موجود از سایر گنجشک سانان در آنالیز تبار شناسی مورد استفاده قرار گرفت. بحث ونتیجه گیری: با توجه به ویژگی های ریخت شناسی و مولکولی به دست آمده در این مطالعه، این جدایه ها با هیچکدام از جدایه های مینای معمولی و نیز انواع سارها شباهت ریخت شناسی نداشته اند و بر این اساس می توان آن ها را گونه جدیدی در نظر گرفت که از نظر ریخت شناسی به صورت کامل توصیف گردیده اند و توالی مولکولی آن ها برای ژن 18SrRNA و COI مورد بررسی قرار گرفته است.
- Abstract
- Background: Isospora is a common and prevalent coccidian parasite among Passeriformes. In this study isosporan oocysts isolated from common mynas (Sturnidae: Passeriformes), which is a very popular pet bird in Iran, were morphologically and molecularly characterized.Material and Methods:Blood and stool samples were taken from five common mynas that were infected with intestinal parasites.Blood smears were preparedand fecal samples containing large amount of oocyts described morphologically by microscopic imaging.PCR on the 18SrRNA and COI genes wereperformed and the resultant products were sequenced. Results:Blood smears taken from the birdsrevealed no schizogonous parasites inside the monocytes.The morphology and size of oocysts every five mynah were similar (p<0.05). The oocysts were spherical 23.3× 22.3; with a shape-index of 1.05; oocyst wall was bi-layered and composed of smooth translucent outer and dark inner layer. There were no oocyst residuum, micropyle and polar granules. Fragments of the 18SrDNA and COI with weights 450 bp and 300 bp respectively. At the 18S locus, Isosporatristisn. sp. exhibited 99.7-98.8% similarity to other available Isospora sequences. Atthe COI locus, I. tristis n. sp. exhibited 99.3-94.5% similarity to sequences available from othe paserines. Discussion& Conclusion:Based on morphological and molecular data, this isolate does not resemble any of the isosporans described from Passeriformes specially Sturnid bird. Hence it is considered a new species of Isospora, from common myna.
