عنوان پایان‌نامه
تهیه نانو ذره دندریمری هدفمند شده با آنتی بادی مونوکلونال هرسژتین جهت انتقال زن به رده سلول های سرطان پستان
- رشته تحصیلی
- بیوفیزیک
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه مرکز تحقیقات بیوشیمی و بیوفیزیک شماره ثبت: 11156ب;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 58424
- تاریخ دفاع
- ۲۲ خرداد ۱۳۹۲
- دانشجو
- مصلح محمدی راد
- استاد راهنما
- هدایت اله قورچیان
- چکیده
- سرطان سینه از مشکلات تهدید کننده سلامت انسان در کشور‌های در حال توسعه است. امروزه، پیشرفت‌ها در زمینه تکنیک‌های مولکولی برحوزه سرطان تاثیر گذاشته است و ژن‌درمانی در سال‌های اخیر پیشرفتهای قابل توجهی داشته است. ژن درمانی موفق به چندین عامل کلیدی بستگی دارد که مهمترین آنها انتقال هدفمند ژن‌های درمانگر به سلول سرطانی بدون آسیب به سلول طبیعی است. دندریمرهای پلی‌آمیدوآمین(PAMAM-G5) پلیمرهای کاتیونی شاخهدار هستند و برای انتقال DNA پلاسمیدی به انواع مختلفی از سلول‌ها استفاده می‌شوند. دندریمرهای PAMAM به راحتی قابل اصلاح شدن می‌باشند و اخیرا برای انتقال ژن استفاده می‌شوند. هرسپتین (آنتی‌بادی‌علیه HER2) برای هدفمند کردن دارو یا ژن در سلول‌های سرطانی بکار می رود چراکه HER2 گیرنده سطح سلولی قابل دسترسی با بیان افزایش یافته در تومور اولیه و محل‌های متاستازی است. در این مطالعه هرسپتین به واسطه پلی‌اتیلن گلیکول آبدوست دوسر عامل دار به PAMAM متصل گردیده وسپس با وکتور pcDNA3.1(Hygro+) که حاوی ژن کشنده tBid است تشکیل پلی‌کمپلکس داده‌است. نتایج حاصل از تعیین میزان مرگ و میر سلولی و Real time PCR کارآیی انتقال و بیان ژن با این نانوحامل‌ها به سلول‌های سرطانی را تأیید می کند. بررسی سمیت سلولی PAMAM-PEG-tBid و PAMAM-PEG-Trastuzumab-tBidبر روی رده های سلولی BT474 وMCF10A کشندگی کمپلکس هدفمند شده در مقایسه با کشندگی کمپلکس غیرهدفمند برای سلول‌های BT474، 155درصد افزایش و برای سلول‌های MCF10A، 4 درصد افزایش داشته است که نشان دهنده هوشمند بودن پلی‌پلکس در هدف‌یابی بوده که منجر به کاهش آسیب به سلول‌های طبیعی گردیده است.
- Abstract
- Breast cancer is one of the problems threatening human health in the developing countries. Today, advances in molecular techniques have influenced the field of cancer treatment. Also gene therapy has developed considerably in recent years. Successful gene therapy depends on several key factors. The most important factor is targeted delivery of therapeutic genes into cancer cells without damage to normal cells. Polyamidoamine (PAMAM-G5) dendrimers are branched cationic polymers and have been used for delivery of plasmid DNA to a variety of cell types. PAMAM dendrimers can easily be modified, and recently they have been used for gene delivery. Herceptin, the antibody against human epidermal growth factor receptor 2 (HER2), is used for gene/drug targeting to cancer cells because HER2 is an easily accessible cell surface receptor over expressed on the primary tumor as well as on metastatic sites. In this study, Herceptin was conjugated to PAMAM by hydrophilic hetro-bifunctional polyethylene glycol and then it formed a complex with the vector of pcDNA3 (Hydro+) which includes the killer gene tBid. The results obtained from cell death determination and real time PCR, indicate the efficiency of gene delivery and expressions in cancerous cells by this nano-carriers. Cytotoxicity assessment (MTT assay) of PAMAM-PEG-tBid and PAMAM-PEG-Trastuzumab-tBib on BT474 and MCF10A cell lines revealed that cytotoxicity of the targeted complex (compared to the untargeted complex) was increased 155% and 4% for BT474 and MCF10A cell lines, respectively. This is an indication of the polyplex selectivity in targeting, which leads to less damage to normal cells.
