عنوان پایان‌نامه
بررسی اثر محتوی نوکلئوتیدی بر مسیر پیام رسانی AMPKدر رده سلولی k۵۶۲
- رشته تحصیلی
- بیوشیمی
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 64023;کتابخانه مرکز تحقیقات بیوشیمی و بیوفیزیک شماره ثبت: 11317ب
- تاریخ دفاع
- ۲۷ خرداد ۱۳۹۳
- دانشجو
- الهه میرزارضی دهقی
- استاد راهنما
- بی بی راضیه یزدان پرست
- چکیده
- سرطان خون یا لوکمیا نوعی بیماری پیش رونده و بدخیم اعضاء خون ساز بدن است که با تکثیر و تکامل ناقص گلبول‌های سفید خون و پیش سازهای آن ایجاد می‌شود. علی رغم روش‌های درمانی متنوع و داروهای زیادی که برای درمان این بیماری استفاده شده است، هیچ کدام در ممانعت از پیشرفت این بیماری موثر واقع نشده‌اند. از آن جایی که لوکمیا بیش از این که یک بیماری مربوط به تکثیر بی رویه سلول‌ها باشد، یک بیماری ناشی از عدم تمایز سلول‌های خونی است، تمایز درمانی از اهمیت بیشتری برخوردار می‌باشد. در این راستا مایکوفنولیک اسید (MPA) به دلیل داشتن توان القای تمایز و اثرات قوی آنتی لوکمیک بسیار مورد توجه قرار گرفته است. بنابراین در این مطالعه به بررسی اثر MPAبر شرایط احیایی درون سلول و فاکتورهای پیام رسان تحت تاثیر شرایط احیایی درون سلول پرداختیم. نتایج حاصل از این مطالعه نشان داد که MPA از طریق اثر بر فعالیت آنتی اکسیدانت‌های آنزیمی نظیر کاتالاز (CAT)، سوپراکسید دیسموتاز (SOD)، گلوتاتیون پراکسیداز (GPX) و همچنین اثر بر میزان آنتی اکسیدانت‌های غیر آنزیمی از قبیل گلوتاتیون (GSH) و تیوردوکسین(Trx)، استرس اکسیداتیو ناشی از عملکرد Bcr-Abl و فاکتورهای زیردست آن را کاهش می‌دهد که با کاهش اکسیداسیون بیومولکول‌های درون سلول همراه است. علاوه براین، نتایج این مطالعه نشان داد که MPA با مهار فعالیت آنزیم سوپر اکسید دیسموتاز در زمان‌های میانی تمایز، استرس اکسیداتیو لازم برای شکل گیری هموگلوبین را فراهم می‌نماید و در واقعSOD هدف مهم MPA در سیستم آنتی اکسیدانتی محسوب می‌شود. علاوه بر این مطالعه‌ی انجام گرفته در رابطه با فاکتورهای درگیر در تمایز اریتروئیدی حاصل از MPA نشان دادکه هیپوکسی موقت ناشی از کاهشGTP درون سلولی محرک بیان فاکتورهای Foxo3a و AMPK? در روند تمایز می‌باشد و حتی پس از حذف این عامل محرک، سطح بیان این دو فاکتوردر مقایسه با سلول‌های کنترل همچنان درحالت افزایش یافته باقی می‌ماند. همچنین، اگرچه انتظار می‌رفت بیان فاکتور پیام رسان SIRT1 که بر فعالیت هر دو فاکتور Foxo3a و AMPK? موثر است افزایش یابد اما تغییری در میزان این فاکتور پیام رسان مشاهده نشد. درمجموع، نتایج این مطالعه نشان داده‌اند که MPA علاوه بر این که قادر به القای تمایز اریتروئیدی می‌باشد، به طور قابل توجهی استرس اکسیداتیو درون سلولی را کاهش می‌دهد. هم چنین با توجه به اهمیت عملکرد فاکتور پیام رسان AMPK? در بیماری‌های متابولیکی نظیر دیابت و گروه وسیعی از سرطان‌ها و توان MPA در تحریک بیان آن، اهمیت این ترکیب در سطح کلینیکی دوچندان خواهد شد.
- Abstract
- Chronic myelogenous leukemia is regarded as a disease of cell maturation rather than multiplication, therefore differentiation therapy has been more extensively under observation. Among the broad spectrum of differentiating agents Mycophenolic acid (MPA) has been evaluated as a suitable candidate due to its immunosuppressant feature. In the present study, we were aimed to evaluate the possible role of oxidative stress and oxidative stress-responsive signaling elements such as AMPK?, Foxo3a and SIRT1 in MPA-associated cell differentiation. Additionally, regarding the requirement of antioxidant system for manipulation of intracellular ROS content, we examined the activity and amount of enzymatic and non-enzymatic antioxidants, respectively. Our results showed that 38% depletion of GTP by MPA led to a significant decrease in the Bcr-Abl mediated production of intracellular ROS content by almost 49.3%. However, our data represented a temporal elevation in intracellular ROS level and subsequent examination proved that the observed build-up is involved in hemoglobinization. Furthermore, our results revealed that erythroid differentiation was accompanied with the augmentation of AMPK? and Foxo3a levels parallel to the temporary elevation in intracellular ROS level. Surprisingly, we did not observe any alteration in the extent of SIRT1 expression. As our data showed, MPA inhibited the activity of superoxide dismutase to provide the requisite oxidative stress for hemoglobinization and then for protecting cells from deleterious effects of this temporal elevated ROS level, the activity of SOD and also catalase augmented at the end of erythroid differentiation. Furthermore, our results showed that glutathione and glutathione peroxidase are responsible for deduction of intracellular ROS level at initial times of MPA-induced erythroid differentiation. In conclusion, our results suggest that GTP depletion by Mycophenolic acid is associated with the regulation of intracellular redox status and oxidative stress– responsive signaling elements such as AMPK? and Foxo3a.
