عنوان پایان‌نامه
کلونینگ و بیان پروتئین آمیلوئید بتا
- رشته تحصیلی
- زیست‌شناسی-علوم‌سلولی‌مولکولی
- مقطع تحصیلی
- کارشناسی ارشد
- محل دفاع
- کتابخانه پردیس علوم شماره ثبت: 5796;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 70557;کتابخانه پردیس علوم شماره ثبت: 5796;کتابخانه مرکزی -تالار اطلاع رسانی شماره ثبت: 70557
- تاریخ دفاع
- ۳۱ شهریور ۱۳۹۴
- دانشجو
- سپیده عبدی کمیشانی
- استاد راهنما
- مهریار امینی نسب
- چکیده
- امروزه آلزایمر در جهان یکی از مهمترین بیماری ها محسوب می گردد. این بیماری سالانه هزینه های مالی و جانی بسیار زیادی بر مردم و دولت ها تحمیل می کند. درنتیجه برای مرتفع تر کردن مشکلات حاصل از آلزایمر، مطالعات بسیاری در سرتاسر دنیا در حال انجام می باشد. پروتئین آمیلوئید بتا، یک پروتئین طبیعی در مغز می باشد. در مغز افراد سالخورده این پروتئین به شکل غیرطبیعی در مغز تجمع پیدا می کند و منجر به بروز بیماری آلزایمر می گردد. امروزه مطالعات بسیاری در جهت کنترل این بیماری، بر روی این پروتئین 42 آمینواسیدی در دست انجام می باشد. همواره اولین گام برای انجام آزمایشات مختلف بر روی آمیلوئید بتا، تولید نوترکیب این پروتئین در مقیاس آزمایشگاهی می باشد.در تحقیق حاضر، cDNA پروتئین آمیلوئید بتا با روش PCR سنتز شد. دو سر ژن و حامل های pET28a و pET32a توسط آنزیم های محدودگر EcoR? و BamH? برش داده شد. صحت توالی قطعه وارد شده با روش تعیین توالی ارزیابی گردید. cDNA وارد حامل ها گردید و سپس حامل های نوترکیب به درون باکتری بیانیBL21(DE3) تراریخت شد. بیان پروتئین القا گردید و در نهایت بیان آن روی ژل SDS-PAGE تایید شد.
- Abstract
- Today Alzheimer ?s is one of the most important diseases around the world which brings lots of financial and life problems for people and governments. However, there are lots of researches in progress to control and cure the Alzheimer ?s disease. Amyloid Beta is a natural protein in the brain. This protein aggregates in elderly people’s brain abnormally and leads to Alzheimer ?s. Today scientists are studying vastly on this 42 amino acid polypeptide to control this disease. The first step to do different experiments on amyloid beta is producing it in laboratory. In this study we used PCR technique to synthesize the cDNA of amyloid beta. To do so, the amyloid beta cDNA produced by PCR was digested with EcoR? and BamH?, and then inserted to digested pET32a and pET28a. The correctness of the inserts was confirmed by sequencing. Then the recombinant vectors were transformed to expression bacteria, BL21(DE3). Expression of recombinant protein was induced and its expression was confirmed by SDS-PAGE. Keywords: Alzheimer, Amyloid Beta, cloning, PCR, expression
